【摘 要】
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为了研究不同HLA B分子对NK细胞杀伤活性的影响 ,我们分别构建pcDNA3 HLA B 390 5 2、B 2 70 4、B 5 1 0 2 2基因真核表达载体 ;借助脂质体将各质粒转染入K5 6 2细胞 ,经G
【机 构】
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上海第二医科大学上海市免疫学研究所免疫遗传室,上海第二医科大学上海市免疫学研究所免疫遗传室,上海第二医科大学上海市免疫学研究所免疫遗传室,上海第二医科大学上海市免疫学研究所免疫遗传室,上海第二医科大学
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为了研究不同HLA B分子对NK细胞杀伤活性的影响 ,我们分别构建pcDNA3 HLA B 390 5 2、B 2 70 4、B 5 1 0 2 2基因真核表达载体 ;借助脂质体将各质粒转染入K5 6 2细胞 ,经G4 1 8筛选 ,分别获得阳性表达细胞株 ;并应用LDH法检测转染细胞对不同个体外周血NK细胞杀伤活性的抑制效应。结果显示 :与转染了空质粒的对照组相比 ,外周血NK细胞对K5 6 2 B39的杀伤率无明显影响 ,而对K5 6 2 B2 7,K5 6 2 B5 1的杀伤率降低。当使用针对NK细胞受体KIR3DL1的单抗DX9封闭NK细胞后 ,此抑制效应大部分消失。提示靶细胞表达HLA Bw4分子可明显抑制NK细胞的杀伤效应 ,而表达HLA Bw6分子对NK细胞杀伤功能无明显影响
In order to study the effect of different HLA B molecules on NK cell killing activity, we constructed the eukaryotic expression vectors of pcDNA3 HLA B 390 5 2, B 2 70 4 and B 5 1022 respectively; transfected each plasmid with liposome The K562 cells were screened by G418 to obtain the positive cell lines respectively. The inhibitory effect of transfected cells on NK cell cytotoxicity in different individuals was detected by LDH assay. The results showed that compared with the control group transfected with the empty plasmid, the killing rate of K5 6 2 B39 in peripheral blood NK cells was not significantly affected, but the killing rate of K5 6 2 B2 7 and K5 6 2 B5 1 was decreased. When NK cells were blocked with the monoclonal antibody DX9 against the NK cell receptor KIR3DL1, most of this inhibitory effect disappeared. Suggesting that the target cells expressing HLA Bw4 molecules can significantly inhibit the killing effect of NK cells, while the expression of HLA Bw6 molecules on NK cell killing function was not significantly affected
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