不同饮食条件糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及诱生型一氧化氮合酶的表达

来源 :中国组织工程研究与临床康复 | 被引量 : 0次 | 上传用户:poloya
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目的:观察不同饮食条件下,糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及诱生型一氧化氮合酶的表达.方法:实验于2004-09/2005-10在新疆医科大学完成.①实验分组:Wistar雄性大鼠60只,随机分为高脂喂养糖尿病组、非高脂喂养糖尿病组和正常对照组,每组20只.②实验方法:高脂饮食糖尿病组大鼠以高脂饲料喂养1个月造模,自由饮水,禁食12 h,将链脲佐菌素冰浴下按10 g/L溶于柠檬酸缓冲液,以25 mg/kg注入精索静脉.非高脂饮食喂养糖尿病组大鼠正常饲料喂养1个月后造模,自由饮水,禁食12 h,链脲佐菌素冰浴下按10 g/L溶于柠檬酸缓冲液,将制得的链脲佐菌素溶液以60 g/L标准给予一次性腹腔内注射.两组大鼠于注射后第7天用血糖仪测定血糖,以不同时间空腹血糖均大于13 mmol/L为糖尿病模型成功标准.正常对照组采用相同剂量的柠檬酸缓冲液注射.分别喂养至3个月时采静脉血5 mL,麻醉后处死大鼠解剖取心肌组织,进行各项指标测定.③实验评估:血胰岛素用放免法测定,血游离脂肪酸、一氧化氮含量用721分光光度计测定,三酰甘油、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平采用全自动生化分析仪测定.用比色法测定心肌组织一氧化氮含酶活性,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡率.结果:60只大鼠均进入结果分析.高脂喂养糖尿病组血糖、一氧化氮、游离脂肪酸、心肌诱生型一氧化氮合酶活性及心肌细胞凋亡百分率均高于非高脂喂养糖尿病组(P<0.05).高脂喂养糖尿病组和非高脂喂养糖尿病组上述指标高于正常对照组(P<0.05).结论:糖尿病大鼠易发生心肌损害,主要表现为心肌细胞凋亡率增加,诱生型一氧化氮合酶的表达增加、一氧化氮水平升高;高脂因素进一步增加上述指标变化.
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