【摘 要】
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目的探讨微小RNA-214 (miRNA-214)对脓毒症小鼠心肌损伤的作用。方法清洁级雄性昆明小鼠66只,体质量25~ 30 g,随机(随机数字法)分为4组:假手术组(Sham组,n=18)、脓毒症组(CLP组,n=18)、miRNA-214前体+脓毒症组(前体组,n=12)、miRNA-214抑制剂+脓毒症组(抑制剂组,n=12),其余6只小鼠应用载有miRNA-214前体和抑制剂的腺病毒转染
【机 构】
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目的探讨微小RNA-214 (miRNA-214)对脓毒症小鼠心肌损伤的作用。
方法清洁级雄性昆明小鼠66只,体质量25~ 30 g,随机(随机数字法)分为4组:假手术组(Sham组,n=18)、脓毒症组(CLP组,n=18)、miRNA-214前体+脓毒症组(前体组,n=12)、miRNA-214抑制剂+脓毒症组(抑制剂组,n=12),其余6只小鼠应用载有miRNA-214前体和抑制剂的腺病毒转染用于空载病对照及miRNA-214转染情况检测。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备小鼠脓毒症模型。Sham组开腹寻找盲肠,不结扎穿孔;前体组、抑制剂组转染后行CLP术。Sham、CLP组小鼠分别于术后6、12、24 h时取心肌组织采用实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)测定miRNA-214表达。于术后12、24 h时采用酶联免疫法(ELISA)测定各组心肌组织炎症因子和血清心肌酶浓度;术后24 h时采用流式细胞技术测定心肌细胞凋亡率,光镜下观察心肌组织病理学结果。采用SPSS 13.0统计学软件进行分析,应用单因素方差分析进行组间差异比较。
结果(1)与Sham组比较,CLP组术后6、12、24 h miRNA-214表达分别升高2.28倍、1.89倍、1.53倍(F值分别为280.198,82.48,30.65;均P<0.05);(2)与CLP组术后12 h比较,转染miRNA-214前体小鼠miRNA-214表达水平升高1.86倍,转染抑制剂小鼠miRNA-214表达下降84.5%(F=394.773;P<0.05);(3)与CLP组比较,前体组小鼠术后12、24 h心肌组织上清液肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6 (IL-6),血清肌钙蛋白(cTnI)及脑钠肽(BNP)水平降低,白介素-10 (IL-10)水平升高;反之,抑制剂组各指标水平升高,IL-10水平降低(12 hF值分别为72.819,88.851,147.546,65.256,102.72;24 hF值分别为50.836,76.167,100.290,60.763,52.580;均P<0.05);(4)与CLP组比较,前体组小鼠术后24 h心肌细胞凋亡率下降,抑制剂组升高(F=151.076;P<0.05);(5)前体组小鼠心肌组织病理学损伤较CLP组、抑制剂组减轻。
结论在CLP所致的小鼠心肌损伤中miRNA-214表达增加,且miRNA-214对CLP诱导的心肌损伤有保护作用。
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