接受拉米夫定治疗的慢性乙肝患者HBV反转录酶区新变异rtM204Q的表型特点分析

• 作 者: 王嫣 刘妍 许智慧 思兰兰 陈丽 戴久增 姚增涛 徐东平
• 机 构: 桂林医学院,解放军302医院全军传染病研究所/肝衰竭诊疗与研究中心病毒性肝炎研究室
• 出 处: 解放军医学杂志
• 发表日期: 2012年6期
• 关键词: 肝炎病毒 乙型 抗药性 病毒 突变 hepatitis B virus drug resistance viral mutation
• 基金项目: 国家“十二五”传染病重大专项子课题（2012ZX10004503）

目的分析乙肝病毒（HBV）反转录酶（RT）区YMDD功能域新变异rtM204Q的表型特点。方法从1例接受拉米夫定（LAM）治疗的慢性乙肝患者血清中提取HBV DNA,扩增HBV全长RT区基因,PCR产物直接克隆到pGEM-Teasy载体中,随机挑选40个克隆进行DNA序列测定并分析耐药相关变异。将Xho I/Sph I双酶切后的RT片段与载体连接成含HBV 1.1倍基因组长度的重组载体。采用FuGENE HD试剂盒,将构建的含野生株和变异株的重组载体转染至人肝癌细胞系HepG2细胞。转染4h后加入不同浓度