【摘 要】
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目的：探讨清脑滴丸（Qingnao dripping pills, QNDP）通过调控微小RNA-223-3p（microRNA-223-3p, miR-223-3p）介导核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3, NLRP3）炎症小体信号通路对急性脑缺血/再灌注损伤大鼠的
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.81973788）；
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目的：探讨清脑滴丸（Qingnao dripping pills, QNDP）通过调控微小RNA-223-3p（microRNA-223-3p, miR-223-3p）介导核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3, NLRP3）炎症小体信号通路对急性脑缺血/再灌注损伤大鼠的作用机制。方法：建立大鼠大脑中动脉栓塞/再灌注（middle cerebral artery occlusion/reperfusion, MCAO/R）损伤模型，随机分为缺血/再灌注损伤模型（MCAO/R）组、MCAO/R+QNDP组、MCAO/R+miR-223-3p拮抗剂（antagomiR-223）组和MCAO/R+QNDP+antagomiR-223组，另设假手术组作为对照，每组18只。MCAO/R术后灌胃给予QNDP （150 mg/kg）, MCAO/R术前24 h侧脑室注射给予antagomiR-223。采用Garcia评分法测定各组大鼠神经功能缺损程度；TTC染色法观察脑缺血体积；干湿重法测定脑含水量；RT-qPCR法测定缺血皮层miR-223-3p表达；Western blot法检测缺血皮层NLRP3、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain, ASC）和cleaved caspase-1蛋白表达；免疫荧光染色法观察NLRP3在缺血侧皮层中的分布情况；ELISA法检测白细胞介素1β（inter-leukin-1β, IL-1β）和IL-18水平。结果：与假手术组比较，MCAO/R组神经功能缺损评分显著降低（P＜0.01），脑缺血体积和脑含水量显著增加（P＜0.01）。与MCAO/R组相比，MCAO/R+QNDP组大鼠的神经功能缺损评分升高，脑缺血体积和脑含水量显著降低（P＜0.01）,miR-223-3p表达增加（P＜0.05）,NLRP3炎症小体（NLRP3、ASC及cleaved caspase-1）蛋白表达，NLRP3分布，以及IL-1β和IL-18水平均显著减少（P＜0.05或P＜0.01）。MCAO/R+QNDP+an-tagomiR-223组上述各项指标与MCAO/R+QNDP组趋势一致（P＜0.05或P＜0.01）。MCAO/R+antagomiR-223组上述各项指标与MCAO/R+QNDP组趋势相反（P＜0.05或P＜0.01）。与MCAO/R+QNDP组比较，MCAO/R+QNDP+an-tagomiR-223组大鼠的神经功能评分显著降低（P＜0.01），脑梗死体积和脑含水量增加（P＜0.05或P＜0.01）,miR-223-3p表达显著减少（P＜0.01）,NLRP3和cleaved caspase-1蛋白表达，NLRP3表达量，以及IL-1β和IL-18水平在缺血侧皮层增加（P＜0.05或P＜0.01）,ASC蛋白差异无统计学意义。与MCAO/R+antagomiR-223组比较，MCAO/R+QNDP+antagomiR-223组大鼠ASC表达水平显著降低（P＜0.01）。结论：QNDP可能通过上调miR-223-3p表达抑制NLRP3炎症小体信号通路，从而减轻脑缺血/再灌注损伤大鼠诱导的炎症反应。
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