SMART技术构建白念珠菌全长cDNA文库

• 作 者: 徐铮 曹永兵 高平挥 张军东 曹颖瑛 唐榕 应康 姜远英
• 出 处: 第二军医大学学报
• 发表日期: 2004年10期
• 关键词: 全长CDNA文库 白念珠菌 抗药性 SMART full-length cDNA libraryCandida albicansdrug resistanceS

目的:为克隆和研究白念珠菌新耐药相关基因,应用SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术,快速构建高质量的白念珠菌全长cDNA文库.方法:采用TRIzol试剂提取不同生长期、不同药物刺激的白念珠菌SC5314的总RNA,经Oligotex试剂盒纯化得到mRNA.利用含Sfi Ⅰ B酶切位点的CDSⅢ/3'PCR引物合成cDNA第1条链,而含SfiⅠA酶切位点的SMART寡核苷酸作为cDNA第1条链在mRNA 5'端