多功能转录因子CTCF重组质粒构建及其表达鉴定

• 作 者: 蒋磊 覃扬 孙芝琳 武静 杨文理 张军哲
• 机 构: 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室
• 出 处: 四川大学学报：医学版
• 发表日期: 2009年1期
• 关键词: CTCF结合因子 融合蛋白 表达 CTCF binding factor Fusion protein Expression
• 基金项目: 国家自然科学基金（批准号30470792）资助

目的构建人CTCF cDNA全长及N端、Zn指、C端3个片段的原核融合表达载体，纯化融合蛋白并进行鉴定。方法以编码CTCF全长序列的质粒为PCR模板，分别构建GST融合表达重组质粒pGEX-4T-2-CTCF，pGEX-4T-2-CTCF-N，pGEX-4T-2-CTCF-Zn，pGEx-4T-2-CTCF-C，转化大肠杆菌BL21，酶切、测序鉴定；优化IPTG诱导表达条件，并对亲和层析纯化的GST融合蛋白CTCF，CTCF-N，CTCF-Zn，CTCF进行Far-Western blot鉴定。结果重组质