人VIGILIN N端融合蛋白的表达及亚细胞定位

来源 :四川大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：xoyo7908114

【摘要】

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目的原核表达人VIGILIN N端基因，制备抗人VIGILIN的多克隆抗体，对人VIGILIN作亚细胞定位。方法用PCR扩增人VIGILIN基因N端，克隆到表达载体pGEX-4T-2中，并在大肠杆菌中以IPTG诱导

【作者】

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魏玲张朝良蒋磊杨文理谢晓砚覃扬

【机构】

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四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室,四川大学口腔疾病研究国家重点实验室

【出处】

：

四川大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

人VIGILIN 融合蛋白克隆原核表达多克隆抗体亚细胞定位 Human VIGILIN Cloning of fusion protein Prokary

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目的原核表达人VIGILIN N端基因，制备抗人VIGILIN的多克隆抗体，对人VIGILIN作亚细胞定位。方法用PCR扩增人VIGILIN基因N端，克隆到表达载体pGEX-4T-2中，并在大肠杆菌中以IPTG诱导表达。产物经Glutathion Sepharose 4B纯化后免疫新西兰白兔制备抗人VIGILIN N端融合蛋白抗体，采用ELISA和Western blot鉴定抗体的效价及特异性。通过细胞免疫荧光染色，观察VIGILIN在细胞中的分布。结果在28℃、1mmol／LIPTG诱导3h的最优条件下

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