【摘 要】
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目的建立表达核苷酸切除修复交叉互补集团1(ERCC1)蛋白细胞系,评价ERCC1表达对草酸铂细胞毒作用的影响。方法由人肠癌肿瘤组织提取RNA,合成cDNA,扩增ERCC1基因片段,Gateway定
【机 构】
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中国医科大学公共卫生学院,中国医科大学基础医学院,荷兰莱顿大学医学中心,中国医科大学公共卫生学院 沈阳110001,沈阳110001
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目的建立表达核苷酸切除修复交叉互补集团1(ERCC1)蛋白细胞系,评价ERCC1表达对草酸铂细胞毒作用的影响。方法由人肠癌肿瘤组织提取RNA,合成cDNA,扩增ERCC1基因片段,Gateway定向克隆技术转染UV20细胞后,细胞抑制率测定(SRB)评价草酸铂的细胞毒作用。结果获得转染成功的UV20-ERCC1细胞,West-ern blot证实ERCC1的表达,细胞抑制率测定(SRB)分析表明,ERCC1表达水平增加与草酸铂敏感性降低密切相关。结论Gateway可成功构建包含ERCC1基因的表达载体,转染细胞后,提供体外研究ERCC1基因功能平台。草酸铂细胞毒作用与ERCC1基因表达水平具有一定关联。
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