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应用双抗体ＥＬＩＳＡ夹心法检测禽类新城疫病毒（ＮＤＶ）抗原，用单克隆抗体或多克隆抗体包被固相载体，将活化的４０孔板作为捕捉待检新城疫病毒抗原，以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）与单克隆抗体的结合物作为示踪抗体，比较了单克隆抗体和多克隆抗体的捕捉效率。结果表明，ＮＤＶ单抗２Ｃ１２、４Ｈ１０优于血清ＩｇＧ，同时确定了双抗体ＥＬＩＳＡ夹心法对不同日龄健康鸡组织产生背景反应的Ｏ．Ｄ．值基本参数，以Ｘ＋２ＳＤ为判定阈值。捕捉抗体２Ｃ１２、４Ｈ１０的工作浓度为５００～４００μｇ／ｍｌ；示踪抗体２Ｃ１２、４Ｈ１０的工作浓度为１∶３０００～１∶２０００，ＥＬＩＳＡ夹心法的灵敏度可达４μｇＮＤＶ蛋白／ｍｌ；对ＮＤＶ不同毒株感染鸡各脏器的ＮＤＶ检出率为：肾１００％、肺９０％。证明用双抗体ＥＬＩＳＡ夹心法检测鸡新城疫病毒抗原特异，敏感，是禽类新城疫病毒检测的新途径