【摘 要】
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目的 研究精子膜特异性蛋白Izumo基因mRNA在内蒙古白绒山羊睾丸和附睾组织中的表达.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法对内蒙古白绒山羊Izumo基因的部分片段进行重新克隆.然后重新设计一对引物,利用RNA印迹技术,以非放射性地高辛标记法对引物进行处理,制成地高辛标记DNA探针,与绒山羊
【机 构】
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010050呼和浩特,内蒙古医学院附属医院生殖医学中心,010058呼和浩特,内蒙古农业大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室
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目的 研究精子膜特异性蛋白Izumo基因mRNA在内蒙古白绒山羊睾丸和附睾组织中的表达.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法对内蒙古白绒山羊Izumo基因的部分片段进行重新克隆.然后重新设计一对引物,利用RNA印迹技术,以非放射性地高辛标记法对引物进行处理,制成地高辛标记DNA探针,与绒山羊睾丸和附睾头、体、尾部组织的总RNA进行杂交.结果 RT-PCR扩增产物片段大小与预期的788 bp相符.RNA印迹试验中,标记的探针浓度为100 pg/μl,检测结果显示Izumo mRNA在内蒙古白绒山羊睾丸和附睾头、体、尾部组织均有表达.结论 内蒙古白绒山羊睾丸和附睾组织均可表达Izumo mRNA,从而为进一步研究Izumo在人类精卵融合中的作用奠定了基础。
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