杂交鳢（斑鳢♀×乌鳢♂）弹状病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作 者: 刘春 曾伟伟 王庆 李凯彬 王芳 常藕琴 梁慧丽 吴淑勤
• 机 构: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
• 出 处: 水产学报
• 发表日期: 2014年1期
• 关键词: 杂交鳢 弹状病毒 G蛋白 TAQMAN real-time PCR 检测方法 hybrid snakehead rhabdovirus G protein
• 基金项目: 国家科技支撑计划（2012BAD25802）,现代农业产业技术体系建设专项（CARS-46）

为了建立一种能在临床上快速、准确检测杂交鳢弹状病毒（HSHRV）的TaqMan实时荧光定量PCR方法，利用PCR技术扩增HSHRV-C1207G蛋白的全长序列，构建重组质粒，作为荧光定量PCR的标准品，根据HSHRV-C1207G蛋白的保守序列，设计合成了一对能特异性扩增143bp片段的引物和TaqMan探针，以标准品为模板建立HSHRV的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法，并对该方法的灵敏度、可重复性和特异性进行评价。结果显示：建立的荧光定量PCR检测方法标准曲线有较好的线性关系，相关系数（R^2）