【摘 要】
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背景:研究发现,在缺氧预处理条件下人牙髓干细胞能够治疗根尖周炎骨缺损,但是缺氧预处理的牙髓干细胞外泌体是否能携带母细胞的生物信息而对巨噬细胞极化产生影响尚不清楚.目的:探讨缺氧处理牙髓干细胞来源外泌体对巨噬细胞极化的影响.方法:将第3代牙髓干细胞放入正常培养箱和缺氧培养箱培养,培养48 h换液1次,当细胞生长至汇合率达80％-90％时收集细胞培养上清液,差速离心法提取外泌体.将人单核细胞系THP-1诱导分化为巨噬细胞,诱导的同时与PBS、正常培养和缺氧培养的牙髓干细胞来源外泌体共孵育48 h,ELISA检
【机 构】
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贵州医科大学口腔医学院/附属口腔医院,贵州省贵阳市 550004;贵州省人民医院口腔科,贵州省贵阳市 550002
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背景:研究发现,在缺氧预处理条件下人牙髓干细胞能够治疗根尖周炎骨缺损,但是缺氧预处理的牙髓干细胞外泌体是否能携带母细胞的生物信息而对巨噬细胞极化产生影响尚不清楚.目的:探讨缺氧处理牙髓干细胞来源外泌体对巨噬细胞极化的影响.方法:将第3代牙髓干细胞放入正常培养箱和缺氧培养箱培养,培养48 h换液1次,当细胞生长至汇合率达80％-90％时收集细胞培养上清液,差速离心法提取外泌体.将人单核细胞系THP-1诱导分化为巨噬细胞,诱导的同时与PBS、正常培养和缺氧培养的牙髓干细胞来源外泌体共孵育48 h,ELISA检测细胞培养上清液中白细胞介素10和肿瘤坏死因子α水平,RT-qPCR检测巨噬细胞CD163、白细胞介素1受体拮抗剂、转化生长因子β1、趋化因子CCL2和肿瘤坏死因子αmRNA表达,流式细胞术检测CD11b+CD163+巨噬细胞表达,Western blot检测NF-κB和STAT3信号通路激活情况.结果 与结论:①与PBS组相比,正常培养牙髓干细胞来源外泌体组巨噬细胞培养上清中白细胞介素10水平显著增加(P<0.05)、肿瘤坏死因子α水平显著降低(P<0.05),巨噬细胞CD163、转化生长因子β1和趋化因子CCL2 mRNA表达均显著上升(P<0.05),肿瘤坏死因子αmRNA表达显著下降(P<0.05),CD11b+CD163+巨噬细胞阳性率显著升高(P<0.05),p65磷酸化水平显著降低(P<0.05),IκBα表达显著升高(P<0.05),STAT3磷酸化水平亦显著升高(P<0.001);②与正常培养牙髓干细胞来源外泌体组相比,缺氧培养牙髓干细胞来源外泌体组巨噬细胞上清中白细胞介素10水平显著升高(P<0.001),肿瘤坏死因子α水平显著降低(P<0.01),CD163、转化生长因子β1、趋化因子CCL2和白细胞介素1受体拮抗剂mRNA表达均显著升高(P<0.01),肿瘤坏死因子αmRNA表达亦显著下降(P<0.01),CD11b+CD163+巨噬细胞阳性率显著升高(P<0.01),p65磷酸化水平显著降低(P<0.01),IκBα表达显著升高(P<0.01),STAT3磷酸化水平显著升高(P<0.01);③结果 表明,正常培养和缺氧培养牙髓干细胞来源外泌体均可促进巨噬细胞M2型极化,且缺氧培养条件下巨噬细胞M2极化更为明显,其机制可能为激活STAT3信号通路,抑制NF-κB信号通路.
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背景:据文献报道,胸腺上皮细胞数量减少、功能紊乱是胸腺退化的重要因素之一,可导致胸腺发育、增殖缺陷以及外周T细胞功能障碍.课题组前期研究发现间充质干细胞在体内可以逆转衰老胸腺的结构和功能,具体作用机制尚不清楚.目的:探讨脐带间充质干细胞在体外对衰老胸腺上皮细胞的作用及影响.方法:将200μmol/L过氧化氢分别作用于第4代胸腺上皮细胞24,48,72,96 h,通过CCK8法检测细胞活力,筛选200μmol/L过氧化氢作用72 h为制备衰老模型合适时间.取第4代脐带间充质干细胞,与衰老的胸腺上皮细胞共培养
背景:心脏衰老是心脏疾病的主要危险因素之一,而细胞衰老是心脏衰老的主要机制,在衰老相关心脏疾病中起重要作用.作者前期工作发现自噬相关基因Uvrag缺失促进小鼠心脏细胞衰老,Rubicon是Uvrag的抑制性互作蛋白,其对小鼠心脏细胞衰老的作用尚不明确.目的:探讨Rubicon基因对心脏细胞衰老的影响.方法:使用15月龄野生型小鼠、Rubicon基因缺失小鼠、Uvrag基因缺失小鼠作为观察对象,其中Uvrag基因缺失小鼠作为阳性对照.采用荧光定量PCR检测小鼠心脏组织衰老相关分泌表型相关因子mRNA表达变化
背景:脂肪干细胞来源广泛、易于获取,人脂肪组织来源的干细胞进入分化骨细胞涉及基因表达的变化主要受miRNA和转录因子调节,但调节脂肪干细胞成骨分化的转录因子-miRNA-mRNA调控网络尚未建立.目的:筛选脂肪干细胞成骨分化过程中的差异表达基因、差异表达miRNA及转录因子,探讨脂肪干细胞成骨分化过程中的转录因子-miRNA-mRNA调控网络及其潜在的靶基因、miRNA和转录因子.方法:从GEO数据库获取3张芯片(GSE37329,GSE63754 mRNA数据芯片2张,GSE72429 miRNA数据芯
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背景:恶性神经胶质瘤经过手术、放疗和化疗后,其预后仍然很差,因此阐明胶质瘤发生发展的分子机制,进一步探索可靠的生物标志物至关重要.非编码RNA在外泌体中富集且稳定,由于其在各种肿瘤的起始和进展中的调节功能而受到了广泛关注.目的:文章就外泌体非编码RNA在胶质瘤中的研究和进展进行概述,介绍外泌体非编码RNA的生物来源,阐明其在胶质瘤中的生物学影响,寻找可靠的肿瘤标志物,以期为神经胶质瘤的诊断和治疗提供新的思路.方法:以“Exosome,Extracellular vesicles,Noncoding RNA
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背景:局部应用骨髓间充质干细胞具有促进骨组织再生修复的能力,但是经静脉注射途径是否能发挥显著作用,及其对于不同生理年龄状态下的骨组织再生修复能力尚需明确.目的:探索尾静脉注射骨髓间充质干细胞对年轻小鼠与衰老小鼠颅骨损伤修复能力的影响.方法:取40只1月龄昆明小鼠作为年轻小鼠,40只12月龄昆明小鼠作为衰老小鼠,再随机分为年轻小鼠实验组、年轻小鼠对照组、衰老小鼠实验组、衰老小鼠对照组.构建颅骨缺损模型,术后1,8,15 d实验组小鼠尾静脉注射0.2 mL骨髓间充质干细胞悬液(1×1010 L-1);对照组小
背景:已有证据表明,LncRNA-HOTAIR能调节骨髓间充质干细胞中成骨相关基因的表达,但其对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响尚未见报道.目的:探讨LncRNA-HOTAIR对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响.方法:体外培养Lewis大鼠脂肪间充质干细胞,转染lncRNA-NC、lncRNA-HOTAIR mimics、lncRNA-HOTAIR inhibitor并进行成骨诱导,成骨诱导第7天检测碱性磷酸酶活性,成骨诱导第14天进行茜素红染色.成骨诱导第6天,通过RT-PCR及Western blot检测
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背景:针对糖尿病患者脂肪间充质干细胞活性不足的机制进行干预,是有效促进糖尿病创面愈合的重要前提.目的:观察糖尿病患者来源脂肪间充质干细胞的生物学特性及促进糖尿病创面愈合的效果.方法:选用相同年龄、性别的正常人与糖尿病患者腹部脂肪获取脂肪间充质干细胞,采用流式细胞术、细胞划痕实验分析两组细胞凋亡、迁移情况,ELISA检测两组细胞培养上清中肝细胞生长因子、碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子水平.制备糖尿病裸鼠创面模型,以皮内注射的方式将不同来源脂肪间充质干细胞混悬液移植到糖尿病裸鼠创面皮肤边缘,移植后0,1