【摘 要】
：
背景:以干细胞为基础的牙周组织再生工程为牙周病治疗提供了广阔前景.雌激素诱导的人牙周膜干细胞成骨分化与Wnt信号通路息息相关.目的:探讨雌激素刺激下Wnt/β-catenin和Wnt/Ca2+信号通路对人牙周膜干细胞成骨分化的影响及通路间的交叉串扰.方法:收集牙周状态健康的前磨牙,分离纯化培养人牙周膜干细胞,流式细胞仪检测表面标志物,茜素红和油红O染色检测成骨成脂分化潜能.取第3代人牙周膜干细胞,随机分为空白组、对照组、雌激素组、XAV939(Wnt/β-catenin通路抑制剂)组、L-690,330(
【机 构】
：
西南医科大学附属口腔医院正畸科,口颌面修复重建与再生实验室,四川省泸州市 646000;阆中市人民医院,四川省阆中市 637400
论文部分内容阅读
背景:以干细胞为基础的牙周组织再生工程为牙周病治疗提供了广阔前景.雌激素诱导的人牙周膜干细胞成骨分化与Wnt信号通路息息相关.目的:探讨雌激素刺激下Wnt/β-catenin和Wnt/Ca2+信号通路对人牙周膜干细胞成骨分化的影响及通路间的交叉串扰.方法:收集牙周状态健康的前磨牙,分离纯化培养人牙周膜干细胞,流式细胞仪检测表面标志物,茜素红和油红O染色检测成骨成脂分化潜能.取第3代人牙周膜干细胞,随机分为空白组、对照组、雌激素组、XAV939(Wnt/β-catenin通路抑制剂)组、L-690,330(Wnt/Ca2+通路抑制剂)组和XAV939+L-690,330组,除空白组外,其他组均进行成骨诱导培养.qRT-PCR和Western blot检测各组成骨标志物(Runx2、OCN)及Wnt/β-catenin和Wnt/Ca2+通路关键信号分子表达;Fluo-4荧光探针检测细胞内Ca2+浓度;碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性;茜素红染色检测成骨分化能力.结果 与结论:①胶原酶消化法分离纯化培养的人牙周膜干细胞呈纺锤形、多边形,流式检测显示其表现出类似间充质干细胞的免疫表型,且具有成骨成脂分化潜能;②10-7 mol/L雌激素可上调人牙周膜干细胞内Ca2+浓度、Wnt/Ca2+通路关键信号分子CaMKII和NLK基因及CaMKII蛋白的表达;③联合使用Wnt/β-catenin和Wnt/Ca2+通路抑制剂能有效抑制细胞成骨分化;④单独使用任一通路抑制剂会上调另一通路活性,但对细胞的成骨分化无显著影响;⑤结果表明,雌激素通过Wnt/β-catenin和Wnt/Ca2+信号通路诱导人牙周膜干细胞成骨分化,且两通路间存在交互串扰,共同促进人牙周膜干细胞的成骨分化.
其他文献
背景:随着医学生物技术的发展,出现了各种人造骨替代物,为未来临床治疗跟骨骨折提供更加广阔的前景.目的:对不同骨修复材料治疗跟骨骨折的方法和进展进行归纳总结.方法:由第一作者运用计算机检索CNKI数据库和PubMed数据库.在标题和摘要中以“跟骨骨折、自体骨、同种异体骨、人工骨”或“Calcaneus fracture,Autologous bone,Allogenic bone,Artificial bone”为检索词进行检索.选择文章与检索关键词材料学特点、生物相容性及其应用效果相关,同一领域文献则选择
背景:异物反应会导致材料植入失败,近些年来对于免疫学的研究逐渐成为热点,选择具有良好免疫性能的支架材料,对于骨缺损修复具有重要意义.目的:探讨去抗原处理的煅烧马鹿角松质骨及未去抗原处理的马鹿角对骨髓来源M1型巨噬细胞生物行为的影响.方法:经过物理及化学方法制备煅烧马鹿角松质骨,通过X射线光电子能谱、傅里叶变换红外光谱检测材料理化性质,制备2种材料浸提液并检测浸提液中Ca、P、Mg的元素水平.体外诱导培养骨髓来源巨噬细胞并在脂多糖和干扰素γ刺激下极化为M1型巨噬细胞,然后与各组浸提液共培养,对照组用单纯IM
背景:选择性瞬变感受器电位蛋白V4(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)激动剂GSK1016790A能够在短时间内激活TRPV4蛋白,表现为Ca2+内流,而蛋白表达量不变.但是在培养过程中,GSK1016790A会使HeLa细胞膜表面TRPV4表达降低,这一现象对神经再生是否产生影响仍不清楚.目的:探究TRPV4激动剂GSK1016790A在不同时期内对神经元轴突再生的影响.方法:取6-8周龄ICR小鼠背根神经节,经过胶原酶和胰酶处理使细胞充分解离
背景:角膜病移植手术面临着角膜供者严重缺乏、术后发生免疫排异反应等诸多问题.在大力倡导角膜捐献的同时,急需找到一种新的替代性的治疗手段.目的:通过优化骨髓间充质干细胞培养条件,探讨转录因子配对盒基因6对骨髓间充质干细胞向角膜缘干细胞样细胞分化的影响.方法:根据细胞形态、成骨成脂分化能力、细胞表面抗原表达鉴定骨髓间充质干细胞及过表达配对盒基因6的骨髓间充质干细胞.按照培养细胞和培养基不同进行分组:对照组(骨髓间充质干细胞+完全培养基)、实验组A(骨髓间充质干细胞+条件培养基)、实验组B(骨髓间充质干细胞+条
背景:生物支架材料诱导建立的血管网络对于细胞存活和新骨形成是至关重要的.近年来,骨组织工程的学者们更多地关注了骨再生过程中不同支架材料对血管生成的影响.目的:阐述能促进血管生成骨生物支架材料的特点及其在促血管化过程中的作用.方法:由第一作者以“Osteogenesis、Biomaterials、bone defect、Angiogenesis、vascularization”为英文检索词,以“成骨分化、生物材料、骨缺损、血管生成、血管化”为中文检索词,检索PubMed、知网数据库中2016至2020年已发
背景:随着血小板输注的广泛应用,血小板输注无效患者呈逐年增多的趋势.目的:通过对血小板输注无效患者的血小板抗体和交叉配型情况进行检测分析,为血小板输注无效患者提高输注效果提供参考依据.方法:选取2020年4-12月期间112例血小板输注无效患者,使用血小板抗体检测试剂盒(固相凝集法)进行血小板抗体检测及交叉配型实验.结果 与结论:①血小板抗体检测结果:112例患者中有103例血小板抗体检测结果为阳性,阳性率高达92％;②血小板交叉配型结果:有25例患者在交叉配型实验中与供者的血小板均不相合,有18例患者与
背景:颊脂垫常用于修复口腔颌面部缺损,其能使口腔黏膜快速上皮分化.由于缺损创面暴露于唾液中,因而认为唾液可能促进颊脂垫中的脂肪干细胞上皮化.目的:探讨唾液体外诱导促进兔脂肪干细胞上皮分化的可行性.方法:取两三个月龄的新西兰大白兔脂肪组织,分离、培养脂肪干细胞并传代.将第3代脂肪干细胞分为3组,即阴性对照组、表皮生长因子组与唾液组,后两组采用10μg/L表皮生长因子、15％唾液来诱导脂肪干细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,诱导7,14 d采用免疫荧光、RT-PCR检测细胞角蛋白19的表达.结果 与结论:①唾
背景:据文献报道,胸腺上皮细胞数量减少、功能紊乱是胸腺退化的重要因素之一,可导致胸腺发育、增殖缺陷以及外周T细胞功能障碍.课题组前期研究发现间充质干细胞在体内可以逆转衰老胸腺的结构和功能,具体作用机制尚不清楚.目的:探讨脐带间充质干细胞在体外对衰老胸腺上皮细胞的作用及影响.方法:将200μmol/L过氧化氢分别作用于第4代胸腺上皮细胞24,48,72,96 h,通过CCK8法检测细胞活力,筛选200μmol/L过氧化氢作用72 h为制备衰老模型合适时间.取第4代脐带间充质干细胞,与衰老的胸腺上皮细胞共培养
背景:心脏衰老是心脏疾病的主要危险因素之一,而细胞衰老是心脏衰老的主要机制,在衰老相关心脏疾病中起重要作用.作者前期工作发现自噬相关基因Uvrag缺失促进小鼠心脏细胞衰老,Rubicon是Uvrag的抑制性互作蛋白,其对小鼠心脏细胞衰老的作用尚不明确.目的:探讨Rubicon基因对心脏细胞衰老的影响.方法:使用15月龄野生型小鼠、Rubicon基因缺失小鼠、Uvrag基因缺失小鼠作为观察对象,其中Uvrag基因缺失小鼠作为阳性对照.采用荧光定量PCR检测小鼠心脏组织衰老相关分泌表型相关因子mRNA表达变化
背景:脂肪干细胞来源广泛、易于获取,人脂肪组织来源的干细胞进入分化骨细胞涉及基因表达的变化主要受miRNA和转录因子调节,但调节脂肪干细胞成骨分化的转录因子-miRNA-mRNA调控网络尚未建立.目的:筛选脂肪干细胞成骨分化过程中的差异表达基因、差异表达miRNA及转录因子,探讨脂肪干细胞成骨分化过程中的转录因子-miRNA-mRNA调控网络及其潜在的靶基因、miRNA和转录因子.方法:从GEO数据库获取3张芯片(GSE37329,GSE63754 mRNA数据芯片2张,GSE72429 miRNA数据芯