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1材料与方法1．1材料酶和试剂：各种限制性内切酶购自Roche公司，T4DNA连接酶购自上海生工公司，Taq聚合酶、dNTP、凝胶回收试剂盒均购自Promega公司，引物由上海生工公司合成，其他试剂均为进口或国产分析纯。植物材料和质粒：棉花洞A雄性可育株由西南大学棉花教研室提供，表达载体P^BП21质粒和大肠杆菌菌株XL1-Blue由西南大学生物技术中心实验室保存。pUCm-T克隆载体购自上海生工公司。