诱导性表达人巨细胞病毒UL138蛋白的胃癌细胞株构建及其效应评价

• 作 者: 张良 陈文静 郭刚强 孙祥威 叶璐璐 胡畅远 金劲激 沈贤
• 机 构: 温州医科大学附属第一医院胃肠外科,温州医科大学微生物学与免疫学教研室分子病毒与免疫研究所热带医学研究所,温州医科大学附属第二医院胃肠外科
• 出 处: 温州医科大学学报
• 发表日期: 2017年2期
• 关键词: 巨细胞病毒 UL138 Tet-on系统 胃肿瘤 基因 肿瘤抑制 cytomegalovirus UL138 Tet-on system gastric neo
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（81472308,81001343,31470891）,温州市科技局科研基金资助项目（Y20150054,Y20150057）.

目的：构建可诱导表达人巨细胞病毒（HCMV）UL138蛋白的稳定遗传胃癌细胞系,并评价UL138对胃癌细胞的生物学效应。方法：将p CMV-tet3G质粒转染BGC-823胃癌细胞,通过G418及荧光素酶活性检测筛选BGCTet-on细胞株。再将含有UL138外源基因的p TRE3G-UL138质粒转染稳定BGCTet-on细胞株,通过G418及潮霉素双抗筛选,获得诱导性表达UL138基因的胃癌细胞（BGC-UL138_（Tet-on））。强力霉素（DOX）诱导后,采用Western blot验证UL13