抗内毒素核心区单克隆抗体及其对革兰阴性菌脓毒性休克症小鼠保护作用的研究

来源 :军事医学科学院院刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kongque168
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通过大肠杆菌Rc突变株(J5)免疫的小鼠脾细胞和Sp2/0骨髓瘤融合,建立了22个抗内毒素单克隆抗体细胞株。对7株进行了Ig类型鉴定:5株为IgM/K,1株为IgG2b/λ,1株为IgG3/λ。5株IgMJi体识别的表位均在内毒素的内核心区。经沉淀法和凝胶过滤法纯化腹水,抗体纯度达90%。在E.coli临床分离物或S-LPS所致的小鼠休克模型上,腹腔注射抗体62.5~125μg/只,实验组存活率比对照组高37.5%~75.0%。体外结合和抑制试验表明,这些抗体与克雷伯杆菌、沙雷茵、鼠伤寒杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌等属有很强的交叉反应,提示本组抗体可能对革兰阴性菌感染有广谱的保护作用。 Twenty-two anti-endotoxin monoclonal antibody cell lines were established by fusion of mouse spleen cells immunized with E. coli Rc mutant (J5) with Sp2 / 0 myeloma. Seven strains were identified as Ig types: 5 strains were IgM / K, 1 strain was IgG2b / λ and 1 strain was IgG3 / λ. The five epitopes recognized by IgMJi were all in the inner core region of endotoxin. The ascites was purified by precipitation and gel filtration, and the antibody purity was 90%. In E. coli clinical isolates or S-LPS-induced mouse shock model, intraperitoneal injection of antibody 62.5 ~ 125μg / only, the experimental group survival rate was 37.5% to 75.0% higher than the control group. In vitro binding and inhibition tests showed that these antibodies and Klebsiella, Salin, Salmonella typhimurium, Shigella, Pseudomonas aeruginosa and other genus have a strong cross-reaction, suggesting that the group of antibodies may be Gram-negative bacteria infection Broad spectrum of protection.
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