【摘 要】
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目的对EST筛选得到的家蝇几丁质酶Ⅰ(MDCⅠ)基因进行序列分析,克隆其cDNA序列并在大肠杆菌中表达。方法采用EST测序技术从已构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到MDCⅠ基因,对其
【基金项目】
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国家自然科学基金(81160204,30960343), 贵州省科技厅基金(黔科合[2010]3160), 高校博士点学科专项科研基金(20105215120001)~~
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目的对EST筛选得到的家蝇几丁质酶Ⅰ(MDCⅠ)基因进行序列分析,克隆其cDNA序列并在大肠杆菌中表达。方法采用EST测序技术从已构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到MDCⅠ基因,对其进行序列测定和分析。以该基因的cDNA文库质粒为模板,通过PCR方法对MDCⅠ基因进行扩增,以pET 28a(+)为载体构建重组质粒,再转化到表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定。结果 MDCⅠ基因全长751bp,编码251个氨
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