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目的
建立一种有效的HBV感染小鼠模型。
方法采用三质粒共转染HEK293细胞生产腺相关病毒-乙型肝炎病毒（AAV-HBV）病毒，反复冻融后密度梯度离心法纯化病毒并进行鉴定。健康成年C57BL/B6小鼠20只按随机数字法分为实验组（n=10）和对照组（n=10），实验组小鼠尾静脉注射AAV-HBV病毒，对照组小鼠注射同等剂量的AAV-GFP病毒。观察两组小鼠一般情况，不同时间点采血检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平，采用荧光定量PCR法、化学发光法分别进行血清HBV DNA和HBsAg定量检测。处死小鼠后获取肝脏进行病理检查，免疫组织化学法检测肝脏组织HBsAg、HBcAg表达。
结果成功获得纯化的AAV-HBV病毒，病毒纯度大于97%。AAV-HBV病毒感染小鼠一般情况良好，无异常表现，且肝功能正常。光镜下观察肝脏组织未见明显病理损伤表现，免疫组织化学检测显示肝细胞质可见HBsAg阳性表达、细胞核可见HBcAg阳性表达。AAV-HBV病毒感染小鼠血液中可稳定检测到HBV DNA和HBsAg表达。
结论成功构建了一种接近人类的，可有效、持续产生病毒的HBV感染小鼠模型。