慢病毒介导的MFN2高表达对肾癌细胞增殖的影响

• 作 者: 黄耿 叶志华 姜卫东 毛青 桂定文
• 机 构: 435000 湖北黄石，湖北理工学院附属医院，鄂东医疗集团黄石市中心医院泌尿外科、肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室,435000 湖北黄石，湖北理工学院附属医院，鄂东医疗集团黄石市中心医院泌尿外科、
• 出 处: 中华生物医学工程杂志
• 发表日期: 2017年23期
• 关键词: 线粒体融合蛋白2 肾肿瘤 细胞周期 细胞增殖

目的

探讨线粒体融合蛋白2 (MFN2）对肾癌细胞增殖的影响，并探讨其分子机制。

方法

将含有MFN2编码序列的慢病毒载体（Lenti-MFN2）感染肾癌细胞株ACHN和A498（实验组），对照组为绿色荧光蛋白基因的慢病毒（Lenti-GFP）。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blotting检测转染后细胞中MFN2 mRNA及蛋白的表达及Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平，流式细胞仪检测转染细胞周期。MTS法和集落形成实验检测细胞活力和增殖能力的变化。

结果

对照组与实验组ACHN细胞中MFN2 mRNA的表达分别为1.04±0.29和4.11±0.78 （P<0.001），A498细胞中MFN2 mRNA的表达分别为1.02±0.24和4.84±1.49 （P=0.002）。实验组MFN2蛋白表达显著上升，Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平显著降低，细胞周期明显抑制，肾癌细胞活力和增殖能力显著下降。

结论

MFN2可能通过抑制肾癌细胞中Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平，抑制细胞周期的进展，导致肾癌细胞活力和增殖能力下降。