泛素羧基末端水解酶L5对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

• 作 者: 丁芳 马建林 吴晓巍 刘芝华
• 机 构: 100021 国家癌症中心 国家肿瘤临床医学研究中心 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室,100021 国家癌症中心 国家肿瘤临床医学研究中心 中国医学科学院北京协和医学院肿
• 出 处: 中华肿瘤杂志
• 发表日期: 2018年40期
• 关键词: 乳腺肿瘤 SW527细胞 泛素羧基末端水解酶L5 细胞增殖 凋亡 预后

目的

探讨泛素羧基末端水解酶L5(UCHL5)在乳腺癌细胞增殖和凋亡过程中的作用。

方法

以慢病毒介导的shRNA系统敲低SW527细胞中UCHL5基因的表达，采用MTS法检测UCHL5表达改变对SW527细胞增殖的影响，采用裸鼠皮下成瘤实验检测UCHL5对SW527细胞裸鼠体内成瘤能力的影响，采用annexinV－PI双染法检测SW527细胞的凋亡。以TCGA浸润性乳腺癌数据分析UCHL5的表达与乳腺癌增殖凋亡相关基因表达的相关性。以Kaplan Meier－plotter在线数据库分析UCHL5表达与乳腺癌患者预后的关系。

结果

敲低UCHL5的表达后，SW527细胞第2、4天的A值分别为0.822±0.017和1.045±0.023，均明显低于对照组细胞在第2、4天的A值(分别为0.976±0.016和1.284±0.025，P<0.001)。在裸鼠成瘤实验中，UCHL5敲低后SW527细胞的成瘤体积为(166.90±75.05)mm³，明显小于对照组细胞的成瘤体积[(329.80±35.84)mm³，P＝0.029]。流式细胞术检测结果显示，敲低UCHL5的表达后，SW527细胞的凋亡比例为(8.60±1.13)%，明显高于对照组[(2.95±0.07)%，P＝0.020]。TCGA数据库分析表明，UCHL5的表达与细胞增殖相关基因的表达呈正相关，且随着UCHL5表达升高，促凋亡相关基因表达下降。Kaplan Meier－plotter分析显示，UCHL5高表达乳腺癌患者的总生存时间和无复发生存时间均明显短于UCHL5低表达患者(均P<0.001)。

结论

敲低UCHL5的表达可抑制SW527细胞的增殖和裸鼠皮下成瘤能力，促进细胞凋亡，并且UCHL5的高表达预示着乳腺癌患者的不良预后。