【摘 要】
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目的 探讨他克莫司诱导的人源耐受性树突细胞(tDC)的生物学特性及免疫抑制功能.方法 分离人外周血单核细胞,在含GM-CSF和IL-4的药品生产质量管理规范级树突细胞(DC)培养液中诱导培养DC,于第3、第5天加入0.1μmol/L他克莫司进一步培养诱导tDC,流式细胞术检测细胞分子标志及存活率.用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)活细胞染色检测诱导的tDC与效应T细胞共培养后的异源CD4
【机 构】
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200040上海,复旦大学附属华山医院血液科,上海市血液中心血液工程研究室,上海市血液中心血液工程研究室,上海市血液中心血液工程研究室,上海市血液中心血液工程研究室,上海市血液中心血液工程研究室
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目的 探讨他克莫司诱导的人源耐受性树突细胞(tDC)的生物学特性及免疫抑制功能.方法 分离人外周血单核细胞,在含GM-CSF和IL-4的药品生产质量管理规范级树突细胞(DC)培养液中诱导培养DC,于第3、第5天加入0.1μmol/L他克莫司进一步培养诱导tDC,流式细胞术检测细胞分子标志及存活率.用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)活细胞染色检测诱导的tDC与效应T细胞共培养后的异源CD4+效应T细胞增殖情况及tDC对成熟DC引起的混合淋巴细胞反应的抑制能力.检测他克莫司诱导的tDC经冻存复苏后的分子标志及免疫抑制功能.结果 他克莫司诱导的tDC显示出典型的耐受性细胞表型:共刺激分子CD80、CD83、CD86及HLA-DR表达水平分别为(2.95±1.32)％、(2.33±1.60)％、(90.02±7.42)％、(91.80±6.18)％,其存活率为(85.24±4.72)％.他克莫司诱导的tDC与效应T细胞共孵育5d,效应T细胞的增殖率为0.42％,且它能有效抑制成熟DC引起的混合淋巴细胞反应,抑制率达(67.01±19.73)％.其在冻存复苏后仍具有表型和功能的稳定性.结论 他克莫司诱导培养的tDC具有典型的免疫耐受细胞表型,不能诱导异源CD4+T细胞增殖,并可有效抑制成熟DC引起的混合淋巴细胞反应。
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