【摘 要】
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目的: 制备高效价的抗人IgG单克隆抗体(mAb), 并用于肾脏免疫性疾病的免疫荧光诊断.方法: 以人IgG全长分子免疫BALB/c小鼠, 按常规方法进行细胞融合, 经筛选及克隆化, 建立可
【机 构】
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第四军医大学病理学教研室,陕西,西安,710032西北大学陕西省生物技术重点实验室,陕西,西安,710069;
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目的: 制备高效价的抗人IgG单克隆抗体(mAb), 并用于肾脏免疫性疾病的免疫荧光诊断.方法: 以人IgG全长分子免疫BALB/c小鼠, 按常规方法进行细胞融合, 经筛选及克隆化, 建立可稳定分泌抗IgG mAb的杂交瘤细胞株.用ELISA及Western blot鉴定mAb的特性(效价、 Ig亚类、特异性及相对亲和力).以纯化的mAb建立免疫荧光染色法, 并用于肾小球肾炎的诊断.结果: 筛选到1株可稳定分泌抗人IgG mAb的细胞株, 腹水效价为1×10-6, Ig亚类为IgG2a(κ), 相对亲和力达到1×10-5, Western blot显示在相对分子质量(Mr)为53×103 处出现特异性的条带, 说明mAb能与IgG的γ链特异性结合.免疫荧光染色的结果显示, IgG分子在肾小球肾炎的活检组织中表达.结论: 获得1株能特异性识别人IgG的mAb, 可用于肾脏免疫性疾病的病理诊断.
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