我国登革2型病毒株E蛋白B抗原区基因的表达与鉴定

来源 :军事医学科学院院刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zuoshuqiong
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目的和方法:通过对登革2型病毒E蛋白B区基因片段的表达,研究B区蛋白的抗原性。首先采用PCR方法扩增了编码B区蛋白的基因片段,并将其插入到pMal-C2原核载体进行融合表达。采用蛋白质印迹法和ELISA法对表达产物进行特异性鉴定。结果与结论:在构建的重组质粒B165-pMal中,E蛋白B区与大肠杆菌的麦芽糖结合蛋白(maltosebindingprotein,MBP)基因以融合形式高效表达。该融合蛋白可与登革1~4型病毒的鼠腹水抗体起特异反应,表明我国登革2型病毒株E蛋白B区具有黄病毒亚组反应性表位。 Objective and Methods: The antigenicity of B protein was studied by expressing the gene fragment of dengue 2 virus E protein B region. Firstly, the gene fragment encoding the protein of region B was amplified by PCR and inserted into pMal-C2 prokaryotic vector for fusion expression. Western blotting and ELISA were used to identify the expression products. RESULTS AND CONCLUSION: In the constructed recombinant plasmid B165-pMal, the E protein B region and E. coli maltose binding protein (MBP) gene were highly expressed in fusion form. The fusion protein can react specifically with murine ascites antibody of dengue virus type 1 ~ 4, indicating that the dengue type 2 strain E protein B region has a flavivirus subgroup reactive epitope.
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