【摘 要】
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目的探讨有效体外构建高质量组织工程骨的细胞种植技术。方法将分离、培养的兔成骨细胞分别通过负压吸引种植技术(A组)及常规种植方法(B组)接种于β-磷酸三钙(β-TCP)支架,计
【机 构】
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解放军第三五九医院骨科,南京医科大学第一附属医院骨科,
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目的探讨有效体外构建高质量组织工程骨的细胞种植技术。方法将分离、培养的兔成骨细胞分别通过负压吸引种植技术(A组)及常规种植方法(B组)接种于β-磷酸三钙(β-TCP)支架,计算接种时细胞与支架材料的复合效率,种植后24h通过扫描电镜观察材料中细胞数量及分布情况。体外培养第3、7、10、14d,检测工程骨中细胞数、碱性磷酸酶(ALP)活性。3周后,免疫组化检测组织工程骨Ⅰ型胶原的分泌情况。结果 A组细胞与支架材料平均复合率、Ⅰ型胶原染色面积、各时间点细胞数及ALP活性表达均高于B组(P<0.05)。结论与传统种植方法比较,采用负压吸引种植技术能在体外形成更高质量的组织工程骨。
Objective To explore the effective cell culture technique for constructing high quality tissue engineered bone in vitro. Methods The isolated and cultured rabbit osteoblasts were inoculated on the β-TCP scaffold by negative pressure implantation (group A) and conventional planting method (group B) respectively. The cell and scaffold materials The composite efficiency was observed by scanning electron microscopy 24 hours after planting the number and distribution of cells in the material. In vitro cultured on the 3rd, 7th, 10th and 14th days, the number of cells in the experimental bone and the activity of alkaline phosphatase (ALP) were detected. Three weeks later, the secretion of collagen Ⅰ was detected by immunohistochemistry. Results The average composite rate of cells and scaffolds in group A, the area of type Ⅰ collagen staining, the number of cells at each time point and ALP activity were all higher than those in group B (P <0.05). Conclusion Compared with the traditional planting methods, the negative pressure suction planting technique can form higher quality tissue engineering bone in vitro.
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