【摘 要】
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以根癌农杆菌介导的叶盘法转化技术将huIGF-I基因转入葡萄组织细胞,并通过既成的再生-转化体系诱导筛选huIGF-I转基因葡萄植株,在抗性筛选中使用卡那霉素浓度为(Kan.)40mg/L,
【机 构】
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西北农林科技大学园艺学院,西北农林科技大学园艺学院,西北农林科技大学园艺学院 陕西杨陵712100中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室海口571101,陕西杨陵712100,陕西杨陵712
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以根癌农杆菌介导的叶盘法转化技术将huIGF-I基因转入葡萄组织细胞,并通过既成的再生-转化体系诱导筛选huIGF-I转基因葡萄植株,在抗性筛选中使用卡那霉素浓度为(Kan.)40mg/L,使用的根癌农杆菌工程菌株为EHA105/pBIGF-I、EHA105/pCIGF-I。最后用PCR技术、Southernblot对转基因植株作分子鉴定,其检测阳性率分别为60%和66.6%。
The huIGF-I gene was transferred into grapevine cells by the Agrobacterium tumefaciens-mediated leaf disc transformation and the huIGF-I transgenic grape plants were induced and induced by the established regeneration-transformation system. The kanamycin- The concentration was (Kan.) 40mg / L. Agrobacterium tumefaciens strains used were EHA105 / pBIGF-I and EHA105 / pCIGF-I. Finally, by PCR, Southern blotting analysis of transgenic plants for molecular identification, the positive rate was 60% and 66.6%, respectively.
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