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环境低温严重影响水稻(Oryza sativa L.)的产量和品质.本实验室前期研究发现,与真核细胞膜鞘磷脂代谢相关的长链基激酶LCBKs (Long chain base kinases)和植物的冷适应密切相关.为了进一步解析LCBKs激酶在水稻中的生物学作用,本研究利用基因组定点编辑技术CRISPR/Cas9,构建了水稻OsLCBK1和OsLCBK2的单基因和双基因编辑载体.通过农杆菌EHA105介导的愈伤转化法侵染粳稻'中花11',抗性筛选获得阳性植株.结合测序分析发现,To代的转基因植株靶标位点发生了多种类型的突变,包括纯合、杂合和双等位等.本研究成功实现了OsLCBK1和OsLCBK2的单基因及双基因定点编辑,获得了多种突变类型的水稻长链基激酶单突变体oslcbk1、oslcbk2以及双突变体oslcbk1&oslcbk2.这些突变体为揭示水稻OsLCBKs响应低温应答以及参与其他生物学过程提供了研究材料.