β1—4半乳糖基转移酶受体底物的动力学

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研究β1-4半乳糖基转移酶(β1-4GT)与受体底物的亲和性、其底物的天线偏爱性以及糖基对亲和性的影响,以及β1-4GT对不同底物的天线特异性(branchspecificity)。用两种荧光标记的底物1(Gnβ1-2Mal-6(Gnβ1—2Mal-3)Mβ1-4Gnβ1—4Gn-PA)和底物2(Gnβ1-2Mal—6(Gnβ1-2Mal-3)Mβ1—4Gnβ1-4(Fucal-6)Gn-PA),用正常雄性大鼠的肝组织的高尔基体作为酶,测定β1-4GT的不同底物的Km值[1]。结果:底物1和2的Km值分别为2.31×10-3mol/L和3.12×10-3mol/L;对底物1,α1,3天线的N-乙酰氨基葡萄糖基比α1,6天线的反应性强,形成Gnβ1-2Mal-6(Gβ1-4Gnβ1-2Mal—3)Mβ1—4Gnβ1-4Gn—PA产物是Gβ1-4Goβ1—2MQl一6(Goβ1-2Mal-3)Mβ1-4Gnβ1-4Gn-PA的2.10倍左右;对底物2,α1,3天线的N-乙酰氨基葡萄糖基比α1,6天线的反应性更强,形成Gnβ1-2Mal-6(Gβ1-4Gnβ1-2Mal-3)Mβ1-4Gnβ1-4(Fucα1-6)Gn-PA的产物是Gβ1-4Gnβ1-2Mal-6(Gnβ1-2Mal-3)Mβ1-4Gnβ1-4(Fucα1—6)Gn-PA的4.59倍左右。结论:核心岩藻糖对酶与受体底物的亲和性有一定影响。
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