镍暴露致A549细胞损伤及L-抗坏血酸干预作用

• 作 者: 付瑶 王玥 韩丹 张琳 马文瀚 潘昱霖 吴永会
• 机 构: 150081 哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室,150081 哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室,150081 哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室,1
• 出 处: 中华劳动卫生职业病杂志
• 发表日期: 2015年33期
• 关键词: 镍 粉尘 抗坏血酸

目的

研究镍冶炼烟尘对人肺腺癌细胞（A549）损伤的影响及L-抗坏血酸的保护作用。

方法

将A549细胞分为染毒组和L-抗坏血酸干预组。染毒组加由镍冶炼烟尘配制的浓度分别为0.00、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00µg/ml的混悬液，干预组在染毒组的基础上加含有L-抗坏血酸（100 mmol/L ），作用24 h。利用MTT法检测细胞存活率。受试物浓度选取0.00、25.00、50.00、100.00 µg/ml进行实验时，用于Flou-3荧光探针检测细胞内Ca²⁺浓度，DCFH-DA检测细胞内活性氧（ROS）含量，实时定量PCR （real time, RT-PCR）法检测细胞内HIF-1α基因表达。

结果

随受试物浓度的升高，25.00, 50.00，100.00 µg/ml染毒组细胞生长抑制率增加，与0 µg/ml染毒组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。镍浓度为25.00, 50.00, 100.00 µg/ml时，染毒组Ca²⁺荧光强度分别为727.70±8.62、777.70±5.50、870.30±13.01，干预组Ca²⁺荧光强度分别为697.30±15.01、731.70±7.76、825.00±10.54；染毒组ROS荧光强度分别为779.70±4.93、824.30±11.68、899.30±3.06，干预组ROS荧光强度分别为751.30±4.50、789.30±5.67、879.70±7.10；染毒组HIF-1α基因相对表达量分别为2.66±0.28、6.45±0.43、27.42±0.44，干预组HIF- 1α基因相对表达量分别为2.10±0.06、5.59±0.27、11.62±0.22；干预组Ca²⁺荧光强度、ROS荧光强度、HIF- 1α基因相对表达量均低于染毒组，差异有统计学意义（P<0.05）。

结论

随镍浓度增加，A549细胞损害增加，L-抗坏血酸对镍引起的细胞损伤有一定保护作用。