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研究沙利度胺对健康人真皮成纤维细胞增殖活性及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白α1 mRNA和Ⅰ型胶原蛋白α1表达的影响,初步探讨沙利度胺抗真皮纤维化的潜在作用。
方法原代培养人正常真皮成纤维细胞,选用第4代成纤维细胞用于后续试验。细胞分为3组,分别用10-3、10-4、10-5 mol/L沙利度胺处理,同时设空白对照组(仅用DMEM培养基处理)。24 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,荧光定量PCR法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白α1 mRNA表达,Western印迹法测定Ⅰ型胶原蛋白α1表达。
结果10-3、10-4 mol/L沙利度胺组细胞存活率为77.40% ± 4.25%、88.56% ± 6.43%,均显著低于空白对照组(100.00% ± 6.74%,均P < 0.05),但10-5 mol/L沙利度胺组(96.66% ± 1.098%)与空白对照组之间差异无统计学意义(P > 0.05)。10-3、10-4、10-5 mol/L沙利度胺组Ⅰ型胶原蛋白α1 mRNA相对表达水平分别为0.279 ± 0.025、0.427 ± 0.040、0.658 ± 0.032,均显著低于空白对照组(1.016 ± 0.003,均P < 0.05),Ⅰ型胶原蛋白α1表达水平亦显著低于空白对照组(均P < 0.05)。Ⅲ型胶原蛋白α1 mRNA表达水平在10-3、10-4、10-5 mol/L沙利度胺组分别为0.551 ± 0.039、0.756 ± 0.025、0.826 ± 0.018,与空白对照组(0.988 ± 0.012)比较显著降低(均P < 0.05)。
结论沙利度胺在一定浓度范围内可抑制健康人真皮成纤维细胞增殖,并抑制Ⅰ型胶原蛋白α1 mRNA和蛋白表达及Ⅲ型胶原蛋白α1 mRNA表达。