【摘 要】
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目的:探讨microRNA-448(miR-448)对类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法:类风湿关节炎滑膜细胞MH7A分成Control组、Anti-NC组(转染inhibitor control)、Anti-miR-448组(转染miR-448 inhibitor)、Anti-miR-448+si-NC组(共转染miR-448 inhibitor、siRNA control)、Anti-miR-448+si-程序性细胞死亡因子5(PDCD5)组(共转染miR-448 inhibitor、
【机 构】
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阜新市中心医院骨外科,辽宁阜新123000
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目的:探讨microRNA-448(miR-448)对类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法:类风湿关节炎滑膜细胞MH7A分成Control组、Anti-NC组(转染inhibitor control)、Anti-miR-448组(转染miR-448 inhibitor)、Anti-miR-448+si-NC组(共转染miR-448 inhibitor、siRNA control)、Anti-miR-448+si-程序性细胞死亡因子5(PDCD5)组(共转染miR-448 inhibitor、PDCD5 siRNA).CCK-8检测细胞增殖,PI单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测C-Caspase-3、cyclin D1、p21蛋白表达.荧光素酶报告系统鉴定miR-448和PDCD5的靶向关系.结果:与Control组和Anti-NC组比较,Anti-miR-448组细胞存活率降低[(100.00±9.52)％、(99.71±10.36)％vs(52.62±4.47)％,P＜0.05],凋亡率升高[(4.32±0.35)％、(4.18±0.62)％vs(12.51±1.32)％,P＜0.05],Go/G1期比例升高[(48.51±3.26)％、(50.80±6.20)％vs(63.81±5.41)％,P＜0.05],细胞中C-Caspase-3、p21蛋白表达水平升高,cyclin D1蛋白表达水平下降.与Anti-miR-448+si-NC组比较,Anti-miR-448+ si-PDCD5组类风湿关节炎滑膜细胞存活率升高[(100.00±10.35)％ vs (147.84 ±16.50)％,P＜0.05],细胞G0/G1期比例降低[(64.08±6.10)％vs(53.11±4.75)％,P＜0.05],细胞凋亡率降低[(13.05±1.16)％vs(6.92±0.35)％,P＜0.05],细胞中C-Caspase-3、p21、PDCD5蛋白表达水平降低,cyclin D1蛋白表达水平升高.结论:下调的miR-448通过靶向上调PDCD5表达抑制类风湿关节炎滑膜细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡.
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