【摘 要】
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目的 通过建立稳定的家兔脑死亡模型,应用TUNEL、免疫印迹和免疫组织化学方法检测脑死亡状态下肝脏细胞凋亡水平,从而研究家兔脑死亡供肝细胞凋亡情况.方法 30只新西兰家兔采
【机 构】
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武汉大学中南医院,武汉大学肝胆疾病研究院,武汉大学移植医学中心,移植医学技术湖北省重点实验室 湖北武汉430071;中南大学湘雅三医院,卫生部移植医学工程技术研究中心 湖南长沙410013
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目的 通过建立稳定的家兔脑死亡模型,应用TUNEL、免疫印迹和免疫组织化学方法检测脑死亡状态下肝脏细胞凋亡水平,从而研究家兔脑死亡供肝细胞凋亡情况.方法 30只新西兰家兔采用缓慢间断颅内加压的方法建立稳定的脑死亡模型,根据脑死亡时间不同分为2、6及8h组,每组10只家兔,同时设立对应时间点的假手术组(30只).分别进行相应处理后收集肝脏组织标本,用TUNEL法检测肝细胞凋亡率,用免疫印迹法检测细胞凋亡蛋白Cleaved-caspase 3的表达,用免疫组织化学方法检测Cleaved-caspase 3的表达.结果 TUNEL检测结果显示,脑死亡组各时间点肝细胞凋亡率均高于对应时间点的假手术组(P＜0.05),且随着脑死亡时间的延长肝细胞凋亡率逐渐升高(P＜0.05).免疫印迹检测结果及免疫组织化学法检测结果均显示,Cleaved-caspase 3蛋白的相对表达量随着脑死亡时间的延长逐渐增高(p＜0.05),且脑死亡组各时间点Cleaved-caspase 3蛋白的相对表达量均高于对应时间点的假手术组(P＜0.05).结论 脑死亡供肝与细胞凋亡的关系密切;随着家兔脑死亡时间的延长,肝细胞凋亡水平逐渐增加,从而影响脑死亡供肝的质量.
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