抗癌胚抗原嵌合重链抗体与核心链霉亲和素融合基因在昆虫细胞中的表达

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将抗癌胚抗原嵌合重链抗体与核心链霉亲和素融合基因插入昆虫杆状病毒供体质粒pFastBacHTa中,经大肠杆菌DHl0Bac体内转座,产生重组杆状病毒pBacHTa-VH-Cr3-CS。将其转染粉纹夜蛾Tn-5B1--4细胞,经扩增后在细胞内进行表达。SDS-PAGE分析结果表明,在粉纹夜蛾Tn-5B1-4细胞中都表达产生一条特异性蛋白质,其相对分子质量约为75 000左右,以Western blot分析表明,该特异条带即为Vh-Cr3-CD蛋白。SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,以HRP标记的生物素作为抗体进行蛋白质印迹在相对分子质量75 000处可见表达条带,表明融合蛋白能特异性的与生物素结合,RIA表明重组杆状病毒表达产生的VH-Cr3-CS蛋白能与CEA有较高的结合力。
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