巯乙磺酸钠对大肠杆菌生物膜早期黏附及胞外聚合物的影响

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:michaelgang1
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目的研究巯乙磺酸钠对大肠杆菌生物膜(biofilm,BF)早期黏附及胞外聚合物(extracellular polymeric sub-stances,EPS)的影响。方法采用了平板菌落计数法检测高浓度(2 mg/ml)、低浓度(0.5 mg/ml)巯乙磺酸钠在不同时间点对大肠杆菌黏附的影响;采用免疫荧光技术标记多糖和细菌,利用激光扫描共聚焦显微镜定性观察细菌黏附及胞外多糖变化;利用硫酸-苯酚法定量各组细菌胞外多糖的产量;利用考马斯亮蓝染料结合法(Bradford法)测定胞外蛋白含量。结果巯乙磺酸钠干预2、4、6、8 h后,与生理盐水对照组比较,各组黏附细菌数均有所减少(P<0.05),高浓度组较低浓度组更明显(P<0.05);经巯乙磺酸钠干预8 h,经FITC-ConA和PI双染后,激光扫描共聚焦显微镜观察见菌落稀疏,散在分布,胞外多糖减少,稀薄,以高浓度为甚;胞外多糖定量实验中,高浓度组胞外多糖/细菌干质量(13.57±0.59)μg/mg、低浓度组(27.77±0.77)μg/mg,分别与生理盐水对照组(35.73±0.44)μg/mg比较,均降低了胞外多糖的产生(P<0.05),高浓度组较低浓度组更明显(P<0.05);胞外蛋白定量实验中,高浓度组胞外蛋白/细菌干质量(7.76±0.32)μg/mg、低浓度组(17.59±0.86)μg/mg分别与生理盐水对照组(23.31±1.36)μg/mg比较,均降低了胞外蛋白的产生(P<0.05),高浓度组较低浓度组更明显(P<0.05)。结论巯乙磺酸钠可显著减少大肠杆菌黏附及产EPS的能力。
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