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摘 要：为了验证活体微生物杀菌剂枯草芽孢杆菌的生防潜力及其适宜剂量，探寻苹果真菌性病害的绿色防控技术，将其与3种苹果园常用不同作用方式化学农药进行对比，进行苹果轮纹病田间防效及贮存期试验。结果表明，应用100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP600～800倍液对苹果轮纹病的防效，与常规化学农药70%代森锰锌WP600倍液、80%多菌灵WG1000倍液、80%甲硫·戊唑醇WP1000倍液的防效相比无显著差异，分别达79.15%、75.39%以上，且对苹果安全。
关键词：微生物杀菌剂;枯草芽孢杆菌;轮纹病;防效
中图分类号 S476 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2021）16-0122-02
Test on the Effect of Bacillus subtilis on Preventing and Curing Apple Rot Disease
ZHAO Yunfu1 et al.
（1Yantai Agricultural Technology Extension Center， Yantai 264001， China）
Abstract： In order to verify the biocontrol potential and appropriate dosage of Bacillus subtilis， and to explore an effective green control method against Apple fungal diseases， the biocontrol effect of Bacillus subtilis was compared with three kinds of chemical pesticides commonly used in orchard against apple Physalospora piricola. The results showed that there was no significant difference between the control effect of 10 billion CFU/g Bacillus subtilis WP 600～800 times and the control effect of 70% mancozeb WP 600 times， 80% carbendazim WG 1000 times and 80%Thiophanate methyl·tebuconazole WP 1000 times， which showed inhibitory effects 79.15% and 75.39%， and it′s safe for apple.
Key words： Microbial fungicide; Bacillus subtilis; Physalospora piricola; Control effect
苹果轮纹病（Physalospora piricola），又称粗皮病、轮纹烂果病，由梨生囊孢壳菌侵染引起，危害枝干和果实，是我国苹果生产中常见的真菌性病害之一。胶东地区作为山东省感病品种富士苹果的最大产地，轮纹病的发生较为严重[1～2]，周年防治次数在4次以上，易发、难防、危害大。一般果园轮纹烂果病的发病率在20%～30%，重者可达50%以上，并可在果实贮藏期继续发病。其防治主要以化学农药为主，但化学农药的高频次施用容易导致农药残留增加、环境污染加剧，诱发病原菌抗耐药性[3～5]。目前，登记为防治苹果轮纹病的农药产品有427种（截至2021年4月），几乎均为化学农药产品，且同质化严重;而活体微生物农药仅仅1种，即100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP。为探寻防治轮纹病化学农药减量控害的生物防治药剂，笔者研究了枯草芽孢杆菌与苹果园常用3种作用方式不同的化学农药代森锰锌、多菌灵、甲硫·戊唑醇的防效比较试验。
1 材料与方法
1.1 试验地概况 试验设在烟台市牟平区武宁镇果园内，树龄11年，栽培密度为3m×4m。果园为壤土，较肥沃，有机质含量约1.2%左右，灌溉条件便利，地面有少量杂草覆盖，往年苹果轮纹病均有发生。
1.2 供试材料 供试苹果品种：红富士;防治对象：苹果轮纹病（Physalospora piricola）。供试药剂：100亿CFU/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂（烟台绿云生物科技有限公司）、70%代森锰锌（瑞德丰生物科技有限公司）、80%多菌灵水分散粒剂（深圳诺普信农化股份有限公司）、80%甲硫·戊唑醇可湿性粉剂（陕西美邦药业集团股份有限公司）。
1.3 试验设计 试验设6个药剂处理和1个清水空白对照，共7个处理，详见表1。每小区包括2株长势一致的果树;重复4次，随机区组排列。
1.4 施藥方法 试验用喷雾器械均为3WBD背负式电动喷雾器，工作压力0.2Mpa，双喷头，平均流量1.75L/min。首次喷药于2019年苹果落花后15d，以后按雨日及间隔时间，每隔15～20d喷药1次，共喷药4次。每株果树喷匀喷透，以药液稍下滴为宜。
1.5 调查内容及方法 苹果收获时，每小区调查中间2株苹果树上的全部果实及落地果（总果数不低于250个），记录总果数、病果数。将采收后各处理果实剔除病、虫、机械损伤果后，每小区各选50个果，当日装入纸箱内，自然室温下贮藏30d调查记录总果数、病果数。计算公式如下：
病果率（%）=（调查病果数/调查总果数）×100;
防治效果（%）=[（空白对照区病果率-处理区病果率）/空白对照区病果率]×100
调查结果采用邓肯氏新复极差法进行统计分析。 2 结果与分析
由表2可知，苹果采收期调查，100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP800倍液、600倍液对苹果轮纹病的田间防效分别为79.15%、79.32%，与常规化学农药70%代森锰锌WP600倍液、80%多菌灵WG1000倍液、80%甲硫·戊唑醇WP1000倍液田间防效无显著差异。采后贮存30d调查，100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP600倍液对轮纹病防效最高，为81.67%，600倍液防效稍低，为75.39%，但100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP800倍液、600倍液，均与3种化学杀菌剂的防效无显著差异。
3 结论与讨论
枯草芽孢杆菌广泛存在于自然界中，活跃于植物根际土壤、体表等外界环境中，同时也是植物体内常见的内生细菌，对人畜无毒无害，不污染环境，具有显著的抗菌活性和抗逆性，且易发酵，成本低廉，可制成各种剂型，甚至可与某些化学农药混用，现已广泛应用于大田作物和温室蔬菜的病害防治，但登记在果树上用于防治病害的产品极少[6-8]。供试的100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP600～800倍液在苹果落花后15d开始喷药，以后按雨日及间隔时间，每隔15～20d喷药1次，共喷药4次，无论在采收期调查或采后贮存30d调查，均可有效控制苹果轮纹病的危害，且对苹果安全。因此，在轮纹病发生前或初期，喷施100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP600～800倍液，可作为苹果轮纹病防治绿色安全、减量控害的有效手段之一。
参考文献
[1]张素敏，刘春雨，徐少锋.园林植物病害发生与防治[M].北京：中国农业大学出版社，2014.
[2]张颜春，王福毅，刘文林，等.2013年套袋红富士苹果轮纹病发生原因分析[J].山西果树，2014（1）：9，11.
[3]修建冰.环渤海湾地区苹果轮纹病菌的多样性研究[D].泰安：山东农业大学，2013.
[4]范昆，付丽，张勇，等.10种杀菌剂对苹果轮纹病菌的室内毒力及田间防治效果研究[J].江西农业学报，2016（28）：35.
[5]王丽，周增强，侯珲.十年来苹果轮纹病菌对戊唑醇的敏感性变化[J].中国南方果树，2019，48（03）：104-106.
[6]马新，黄永，程娟，等.枯草芽孢杆菌微囊剂的制备及其对番茄立枯病的防治效果[J].农药学学报，2015，17（4）：462-468.
[7]秦燕，楊明贵，赵永康，等.3种药剂对草莓白粉病的生物防治药效试验[J].安徽农业科学，2019（17）：143-144，147.
[8]丁宇倩，任佐华，黎圆花，等.枯草芽孢杆菌JN005可湿性粉剂研制及其对稻瘟病防治效果[J].农药，2019，58（06）：28-32.
（责编：张宏民）
关键词：微生物杀菌剂;枯草芽孢杆菌;轮纹病;防效
中图分类号 S476 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2021）16-0122-02
Test on the Effect of Bacillus subtilis on Preventing and Curing Apple Rot Disease
ZHAO Yunfu1 et al.
（1Yantai Agricultural Technology Extension Center， Yantai 264001， China）
Abstract： In order to verify the biocontrol potential and appropriate dosage of Bacillus subtilis， and to explore an effective green control method against Apple fungal diseases， the biocontrol effect of Bacillus subtilis was compared with three kinds of chemical pesticides commonly used in orchard against apple Physalospora piricola. The results showed that there was no significant difference between the control effect of 10 billion CFU/g Bacillus subtilis WP 600～800 times and the control effect of 70% mancozeb WP 600 times， 80% carbendazim WG 1000 times and 80%Thiophanate methyl·tebuconazole WP 1000 times， which showed inhibitory effects 79.15% and 75.39%， and it′s safe for apple.
Key words： Microbial fungicide; Bacillus subtilis; Physalospora piricola; Control effect
苹果轮纹病（Physalospora piricola），又称粗皮病、轮纹烂果病，由梨生囊孢壳菌侵染引起，危害枝干和果实，是我国苹果生产中常见的真菌性病害之一。胶东地区作为山东省感病品种富士苹果的最大产地，轮纹病的发生较为严重[1～2]，周年防治次数在4次以上，易发、难防、危害大。一般果园轮纹烂果病的发病率在20%～30%，重者可达50%以上，并可在果实贮藏期继续发病。其防治主要以化学农药为主，但化学农药的高频次施用容易导致农药残留增加、环境污染加剧，诱发病原菌抗耐药性[3～5]。目前，登记为防治苹果轮纹病的农药产品有427种（截至2021年4月），几乎均为化学农药产品，且同质化严重;而活体微生物农药仅仅1种，即100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP。为探寻防治轮纹病化学农药减量控害的生物防治药剂，笔者研究了枯草芽孢杆菌与苹果园常用3种作用方式不同的化学农药代森锰锌、多菌灵、甲硫·戊唑醇的防效比较试验。
1 材料与方法
1.1 试验地概况 试验设在烟台市牟平区武宁镇果园内，树龄11年，栽培密度为3m×4m。果园为壤土，较肥沃，有机质含量约1.2%左右，灌溉条件便利，地面有少量杂草覆盖，往年苹果轮纹病均有发生。
1.2 供试材料 供试苹果品种：红富士;防治对象：苹果轮纹病（Physalospora piricola）。供试药剂：100亿CFU/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂（烟台绿云生物科技有限公司）、70%代森锰锌（瑞德丰生物科技有限公司）、80%多菌灵水分散粒剂（深圳诺普信农化股份有限公司）、80%甲硫·戊唑醇可湿性粉剂（陕西美邦药业集团股份有限公司）。
1.3 试验设计 试验设6个药剂处理和1个清水空白对照，共7个处理，详见表1。每小区包括2株长势一致的果树;重复4次，随机区组排列。
1.4 施藥方法 试验用喷雾器械均为3WBD背负式电动喷雾器，工作压力0.2Mpa，双喷头，平均流量1.75L/min。首次喷药于2019年苹果落花后15d，以后按雨日及间隔时间，每隔15～20d喷药1次，共喷药4次。每株果树喷匀喷透，以药液稍下滴为宜。
1.5 调查内容及方法 苹果收获时，每小区调查中间2株苹果树上的全部果实及落地果（总果数不低于250个），记录总果数、病果数。将采收后各处理果实剔除病、虫、机械损伤果后，每小区各选50个果，当日装入纸箱内，自然室温下贮藏30d调查记录总果数、病果数。计算公式如下：
病果率（%）=（调查病果数/调查总果数）×100;
防治效果（%）=[（空白对照区病果率-处理区病果率）/空白对照区病果率]×100
调查结果采用邓肯氏新复极差法进行统计分析。 2 结果与分析
由表2可知，苹果采收期调查，100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP800倍液、600倍液对苹果轮纹病的田间防效分别为79.15%、79.32%，与常规化学农药70%代森锰锌WP600倍液、80%多菌灵WG1000倍液、80%甲硫·戊唑醇WP1000倍液田间防效无显著差异。采后贮存30d调查，100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP600倍液对轮纹病防效最高，为81.67%，600倍液防效稍低，为75.39%，但100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP800倍液、600倍液，均与3种化学杀菌剂的防效无显著差异。
3 结论与讨论
枯草芽孢杆菌广泛存在于自然界中，活跃于植物根际土壤、体表等外界环境中，同时也是植物体内常见的内生细菌，对人畜无毒无害，不污染环境，具有显著的抗菌活性和抗逆性，且易发酵，成本低廉，可制成各种剂型，甚至可与某些化学农药混用，现已广泛应用于大田作物和温室蔬菜的病害防治，但登记在果树上用于防治病害的产品极少[6-8]。供试的100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP600～800倍液在苹果落花后15d开始喷药，以后按雨日及间隔时间，每隔15～20d喷药1次，共喷药4次，无论在采收期调查或采后贮存30d调查，均可有效控制苹果轮纹病的危害，且对苹果安全。因此，在轮纹病发生前或初期，喷施100亿CFU/g枯草芽孢杆菌WP600～800倍液，可作为苹果轮纹病防治绿色安全、减量控害的有效手段之一。
参考文献
[1]张素敏，刘春雨，徐少锋.园林植物病害发生与防治[M].北京：中国农业大学出版社，2014.
[2]张颜春，王福毅，刘文林，等.2013年套袋红富士苹果轮纹病发生原因分析[J].山西果树，2014（1）：9，11.
[3]修建冰.环渤海湾地区苹果轮纹病菌的多样性研究[D].泰安：山东农业大学，2013.
[4]范昆，付丽，张勇，等.10种杀菌剂对苹果轮纹病菌的室内毒力及田间防治效果研究[J].江西农业学报，2016（28）：35.
[5]王丽，周增强，侯珲.十年来苹果轮纹病菌对戊唑醇的敏感性变化[J].中国南方果树，2019，48（03）：104-106.
[6]马新，黄永，程娟，等.枯草芽孢杆菌微囊剂的制备及其对番茄立枯病的防治效果[J].农药学学报，2015，17（4）：462-468.
[7]秦燕，楊明贵，赵永康，等.3种药剂对草莓白粉病的生物防治药效试验[J].安徽农业科学，2019（17）：143-144，147.
[8]丁宇倩，任佐华，黎圆花，等.枯草芽孢杆菌JN005可湿性粉剂研制及其对稻瘟病防治效果[J].农药，2019，58（06）：28-32.
（责编：张宏民）