体外灌注法分离大鼠肝脏Kupffer细胞及原代培养

• 作 者: 曾仲 黄汉飞 宋飞 段键
• 机 构: 昆明医学院第一附属医院器官移植中心
• 出 处: 世界华人消化杂志
• 发表日期: 2009年25期
• 关键词: KUPFFER细胞 细胞分离 原代培养 Kupffer cells Cell isolation Primary culture

目的：探讨一种简便、高效的大鼠离体肝脏分离Kupffer细胞（KCs）及原代培养的方法.方法：采用大鼠肝脏离体Ⅳ型胶原酶灌注,剪碎肝脏,37℃消化30min,低速离心去除肝细胞,Percoll不连续密度梯度离心和选择性贴壁的方法分离KCs.通过墨汁吞噬实验和ED2免疫细胞化学来鉴定KCs.结果：分离的KCs的得率在细胞贴壁前（2.1±0.3）×10^6/g肝脏、贴壁后（1.5±0.1）×10^6/g肝脏,用0.4%台盼蓝染色,活率大于92%,ED2染色阳性的细胞达9