【摘 要】
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目的:构建Smad2特异性siRNA表达克隆,探讨其在肝星状细胞(HSCs)中是否能够有效地抑制Smad2的表达.方法:利用生物软件进行Smad2 mRNA二级结构模拟,选择合适的靶位点,使用pBSKU
【机 构】
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上海第二医科大学附属仁济医院普外科
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目的:构建Smad2特异性siRNA表达克隆,探讨其在肝星状细胞(HSCs)中是否能够有效地抑制Smad2的表达.方法:利用生物软件进行Smad2 mRNA二级结构模拟,选择合适的靶位点,使用pBSKU6载体表达Smad2特异性siRNA,在体外转染HSC-T6细胞株,应用RT-PCR和Westem-blot技术检测Smad2 mRNA和蛋白的表达情况.结果:成功构建siRNA表达克隆,转染后Smad2在基因和蛋白的表达水平均受到了明显抑制.在构建成功的4个克隆中,CR4抑制mRNA表达最为显著,达90%
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