【摘 要】
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目的:采用RNA靶向干扰技术,研究人胃癌细胞BGC823中微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-200c的靶点锌指E盒增强子结合蛋白2(zinc finger E-box enhancer binding protein 2,ZEB2)基
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院北院消化科,上海 201801;江西省九江市第一人民医院感染控制科,江西 九江 332000;江西省九江市妇幼保健医院检验科,江西 九江 332000;安徽省蚌埠医学院病
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目的:采用RNA靶向干扰技术,研究人胃癌细胞BGC823中微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-200c的靶点锌指E盒增强子结合蛋白2(zinc finger E-box enhancer binding protein 2,ZEB2)基因的表达情况,并检测相关的波形蛋白基因表达情况,观察miR-200c对胃癌BGC823细胞功能的影响.方法:构建ZEB2基因表达的干扰质粒shZEB2,用Lipofectamine 2000转染胃癌BGC823细胞,用G418筛选稳定转染细胞株,进行实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测人BCG823细胞中ZEB2 mRNA、miR-200c及波形蛋白基因的表达水平,并用蛋白印迹法检测ZEB2蛋白、波形蛋白表达水平,噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测细胞增殖能力;Transwell小室检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力.结果:干扰ZEB2分子表达后,miR-200c表达水平增高,而BGC823细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显下降.结论:ZEB2是miR-200c的检测靶点,干扰ZEB2后,胃癌细胞BGC823的增殖、迁移及侵袭能力明显降低.
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