【摘 要】
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目的 从雄激素受体阳性(AR+)乳腺癌细胞株中分离出乳腺微球体(MSs)进行培养和鉴定.方法 将3种AR+乳腺癌细胞株(MCF-7、MDA-MB-231及T47D)接种在添加生长因子的DMEM/F12培养基中,观察MSs的形成及生长;细胞免疫荧光检测MCF-7、MDA-MB-231及T47D中雄激素受体(AR)的表达;流式细胞术(FCM)检测贴壁细胞及MSs中CD44+ CD24-/low细胞的含
【机 构】
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300060天津医科大学肿瘤医院乳腺病理研究室国家肿瘤临床医学研究中心乳腺癌防治教育部重点实验室天津市肿瘤防治重点实验室,300060天津医科大学肿瘤医院乳腺病理研究室国家肿瘤临床医学研究中心乳腺癌防
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目的 从雄激素受体阳性(AR+)乳腺癌细胞株中分离出乳腺微球体(MSs)进行培养和鉴定.方法 将3种AR+乳腺癌细胞株(MCF-7、MDA-MB-231及T47D)接种在添加生长因子的DMEM/F12培养基中,观察MSs的形成及生长;细胞免疫荧光检测MCF-7、MDA-MB-231及T47D中雄激素受体(AR)的表达;流式细胞术(FCM)检测贴壁细胞及MSs中CD44+ CD24-/low细胞的含量;单克隆形成实验检测MSs细胞的自我更新能力.结果 乳腺癌细胞株在无血清培养基中呈悬浮生长,7~10d可形成MSs;细胞免疫荧光显示MCF-7、T47D中AR主要在细胞质中表达、MDA-MB-231中AR在细胞核及细胞质中均有表达;流式细胞术检测MCF-7、MDA-MB-231及T47D贴壁细胞中CD44+ CD24-/low细胞含量分别为50.0%、86.4%、3.2%,悬浮细胞中CD44+ CD24-/low细胞含量分为87.4%、98.8%、38.4%;克隆形成实验显示随着时间的推移形成的克隆球体积不断增大.结论 悬浮生长的MDA-MB-231及MCF-7细胞可作为研究AR阳性乳腺癌干细胞的良好模型。
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