【摘 要】
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鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3)又称为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV),是一种高传染性、致死性病毒.为开发新型CyHV-3 DNA疫苗,前期研究中将CyHV-3 ORF14
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广东 广州 510642广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站,广东 广州 510640;广东省农业科学
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鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3)又称为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV),是一种高传染性、致死性病毒.为开发新型CyHV-3 DNA疫苗,前期研究中将CyHV-3 ORF148基因插入pEGFP-N1构建重组质粒,在此基础上,本研究通过转染试验、间接免疫荧光试验证实pORF148-EGFP融合蛋白可以在CCB-J细胞系和建鲤体内表达;将重组质粒作为DNA疫苗,肌肉注射免疫建鲤鱼苗,ELISA检测表明免疫pEGFP-ORF148重组质粒可以显著提高建鲤血清特异性抗体水平;RT-qPCR检测显示,免疫pEGFP-ORF148重组质粒后,建鲤脾脏和头肾中的免疫相关基因如IFN-a1、Mx-1、CXCa、CXCR1、TNF-α、IL-1β及IgM基因表达量均显著提高.攻毒实验显示,CyHV-3攻毒21 d后,PBS组、pEGFP-N1组和pEGFP-ORF148组的建鲤存活率分别为30％、35％和85％,免疫pEGFP-ORF148可以显著提高建鲤的存活率(P<0.01).本研究旨在为CyHV-3 DNA疫苗的应用提供理论依据.
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