肝纤维化相关细胞因子双重RNA干扰质粒的构建及转染肝星状细胞研究

• 作 者: 蒋玉凤 周德江 张建军 黄飞 史小玲
• 机 构: 泸州医学院附属医院感染病科,四川省成都军区总医院消化内科,四川省广元市第一人民医院,湖北省荆州市中心医院感染病科,泸州医学院附属医院中心实验室
• 出 处: 实用肝脏病杂志
• 发表日期: 2012年6期
• 关键词: 肝纤维化 RNA干扰 质粒载体 结缔组织生长因子 金属蛋白酶组织抑制因子-1 肝星状细胞 Hepatic fibrosisRNA interferenceCon
• 基金项目: 四川省卫生厅科技项目（编号：080197）,四川省重点学科资助项目（SZD0421）

目的构建以大鼠CTGF和TIMP-1基因为靶点的双重RNA干扰表达载体质粒,以检测其转染肝星状细胞的效率.方法筛选出对CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA干扰靶位,各设计1对含有短发夹结构的RNA 干扰靶点序列,分别克隆到质粒载体psiRNA-DUO-GFPzeo,构建含目的靶基因片段的重组质粒载体psiRNA-GFP-CT-GF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com（含有CTGF和TIMP-1）,进行酶切和测序鉴定.将构建成功的重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、ps