【摘 要】
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旨在获得产气荚膜梭菌β毒素(CPB)的重组突变体,并评价其毒力及免疫保护性。对已知的产气荚膜梭菌CPB编码基因进行优化设计,同时引入4个氨基酸突变位点,分别是第212位的精氨
【机 构】
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中国兽医药品监察所,重庆市畜牧科学院
【基金项目】
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动物基因工程疫苗国家重点实验室开放课题(AGVSKL-ZD-201801),重庆荣昌农牧高新技术产业研发专项(19256),中国兽医药品监察所所级课题(201810)
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旨在获得产气荚膜梭菌β毒素(CPB)的重组突变体,并评价其毒力及免疫保护性。对已知的产气荚膜梭菌CPB编码基因进行优化设计,同时引入4个氨基酸突变位点,分别是第212位的精氨酸突变为谷氨酸,第268位的亮氨酸突变为甘氨酸,266位的酪氨酸和275位的色氨酸突变为丙氨酸。此外,在该基因5′端添加Th细胞表位(T)和鞭毛蛋白(flagellin)N末端的编码序列,经人工合成获得重组基因片段(GTFNCPBm4)。将GTFNCPBm4克隆至原核表达载体pET-30a(+)中进行表达与纯化,获得重组蛋白rTFNC
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