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目的：建立高效液相色谱法测定人体血浆中甲氨蝶呤浓度的方法。方法：血浆样品经处理后，色谱分离采用Zorbax0DSc，8（250mm×4·6mm，5μm）色谱柱，检测波长为302nm，流动相为0．01mol·L^-1，磷酸盐（用磷酸溶液调pH6．7）-甲醇（80：20），流速为1·0mL·min^-1，柱温为35℃。结果：甲氨蝶呤血药质量浓度在0．2～50mg·L^-1，（r=0．9997）范围内线性关系良好，最低检测质量浓度为5μg·L