【摘 要】
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前期研究表明新城疫病毒(NDV)HN蛋白为病毒热稳定性的主要影响因子.为了进一步研究HN蛋白的热稳定性以及影响其热稳定性的结构特征,研究利用杆状病毒表达了NDV TS09-C耐热株
【机 构】
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长江大学动物科学学院,湖北荆州434025;农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/畜禽病原微生物学湖北重点实验室/湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;农业农村部畜禽细菌病防治制
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前期研究表明新城疫病毒(NDV)HN蛋白为病毒热稳定性的主要影响因子.为了进一步研究HN蛋白的热稳定性以及影响其热稳定性的结构特征,研究利用杆状病毒表达了NDV TS09-C耐热株的HN蛋白的胞外区,将两个拷贝的TS09-C株HN胞外区基因分别插入到载体pFastBac-dual的PH启动子和p10启动子下游,在HN蛋白的N端连接上杆状病毒rEGT基因的分泌信号肽和His标签.通过转座和病毒拯救试验获得表达HN蛋白的重组杆状病毒rAc-tTS/HN2.蛋白表达结果表明,NDV HN蛋白表达在细胞内,并没有分泌到细胞外,且在细胞内主要以可溶形式存在.研究实现了NDV HN蛋白在昆虫细胞内可溶性表达,为后续的HN蛋白的热稳定性研究和NDV耐热机制研究奠定了基础.
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