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目的 研究鼠成骨细胞MC3T3-E1与制备的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)与多壁碳纳米管(MWCNT)的复合膜共培养时反应的机制.方法 使用溶剂浇铸法制备PLGA-MWCNT复合膜.把MC3T3-E1细胞在PLGA-MWCNT复合膜、PLGA膜及聚苯乙烯组织培养板(TCPS)上培养72 h,通过RT-PCR观察成骨标志基因碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)表达的变化.Western免疫印迹和免疫荧光分析观察各组细胞活性、黏着斑激酶(pFAK)的表达.应用Western免疫印迹检测各组MC3T3-E1细胞p-ERK1/2、p-JNK、p-p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)蛋白的表达.各组添加ERK1/2抑制剂PD98059 (30 mmol/L),培养72 h后进行MTT、Live/Dead染色和Texas Red-labeledphalloidin染色,使用激光共聚焦显微镜观察细胞活性和肌动蛋白纤维产生的变化.结果 与PLGA组和TCPS组比较,PLGA-MWCNT组细胞的ALP、BSP、OCN的表达水平明显更高(均P＜0.05),而PLGA和TCPS组3种成骨标志基因表达差异没有统计学意义(均P＞0.05).PLGA-MWCNT组pFAK染色更加均匀、表达水平最高,MC3T3-E1细胞的pFAK表达水平PLGA-MWCNT组＞PLGA组＞TCPS组(2.3±0.3比1.4±0.2比1±0.2,均P＜0.05).PLGA-MWCNT组的MC3T3-E1细胞的p-ERK1/2的条带灰度值更高,表达水平要明显高于PLGA组及TCPS组(3.3±0.2比1.3±0.2、1±0.2,均P＜0.05),而各组p-p38 MAPK及p-JNK的条带灰度值差异则无统计学意义(均P＞0.05).各组细胞加入ERK1/2抑制剂PD98059培养72 h后,3组细胞活性和肌动蛋白纤维产生均减少(均P＜0.05),与其余两组相比,PLGA-MWCNT组的细胞活性下降更明显,肌动蛋白纤维产生减少更显著.PLGA-MWCNT复合膜的live/dead染色图像上出现较多的红染细胞,其细胞活性比未加前明显下降(0.33±0.02比0.57±0.03,P＜0.05).结论 PLGA/MWCNT复合膜能够促进MC3T3-E1细胞成骨基因的表达、FAK及ERK1/2激活,从而促进MC3T3-E1细胞分化、肌动蛋白产生.