【摘 要】
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目的 探讨不同粒径及纯度的雄黄颗粒对HepG2细胞的凋亡诱导作用及其作用机制.方法 按前期实验方法制备各组不同粒径及纯度的雄黄颗粒,实验分为6组:天然雄黄(CR)组、纯化雄黄(
【机 构】
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中南大学湘雅医院肝脏外科,长沙,410008
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目的 探讨不同粒径及纯度的雄黄颗粒对HepG2细胞的凋亡诱导作用及其作用机制.方法 按前期实验方法制备各组不同粒径及纯度的雄黄颗粒,实验分为6组:天然雄黄(CR)组、纯化雄黄(PR)组、天然纳米雄黄(CRN)组、纯化纳米雄黄(PRN)组、丝裂霉素(Mit)组、对照组,分别使用相应药物处理HepG2细胞,对照组不进行处理.噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度的各组雄黄颗粒作用HepG2细胞12、24、48、72 h后的细胞增殖率并筛选最佳作用浓度和作用时间.各组HepG2细胞分别经20.0 μ/ml的不同药物处理24 h后观察细胞形态学变化,流式细胞术测定凋亡率,实时PCR测定Bcl-2、BaxmRNA表达水平.结果 MTT法显示,经不同组别雄黄颗粒处理后HepG2细胞增殖率均有不程度降低,且其抑制作用具有时间效应和浓度效应;通过MTT法筛选出最佳作用浓度及作用时间为20.0 μ/ml和24 h.细胞形态学检测发现各组雄黄颗粒能诱导HepG2细胞出现核溶解、破裂等特征性凋亡形态变化.流式细胞术证实各组雄黄颗粒均可诱导HepG2细胞发生凋亡,主要表现为早期凋亡.实时PCR显示,与对照组比较,不同组别雄黄颗粒处理后Bcl-2 mRNA表达下调,Bax mRNA表达上调(均P＜0.05).结论 雄黄颗粒对HepG2细胞的诱导凋亡作用随着粒径的降低及纯度的提高而增强,其作用机制可能与下调Bcl-2基因表达、上调Bax基因表达有关.
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