【摘 要】
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目的构建含SV40u抗原基因的逆转录病毒载体并转染鼠肝细胞,检测SV40LT抗原基因在肝细胞中的表达情况,为肝细胞移植研究打下基础.方法利用体外基因重组技术构建含SV40LT抗原基
【机 构】
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中南大学湘雅医院普外科,中南大学湘雅医院肝胆肠外科研究中心
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目的构建含SV40u抗原基因的逆转录病毒载体并转染鼠肝细胞,检测SV40LT抗原基因在肝细胞中的表达情况,为肝细胞移植研究打下基础.方法利用体外基因重组技术构建含SV40LT抗原基因的逆转录病毒载体并酶切、测序鉴定,脂质体介导转染PA317细胞,G418抗性筛选阳性克隆,通过MH3T3细胞测定病毒滴度;分离、纯化大鼠肝细胞后,将含SV40LT抗原基因的假病毒颗粒感染肝细胞,用PCR及免疫组化法检测转染肝细胞中SV40LT抗原基因的表达情况.结果(1)酶切分析、测序证明重组逆转录病毒载体含有SV40LT抗原
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