【摘 要】
：
目的 探讨萝卜硫素对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法 用10、20、40μmol/L萝卜硫素处理人正常肝细胞L02、肝癌HepG2细胞48h,通过CCK-8法筛选合适的萝卜硫素浓度用于后续实验;将HepG2细胞分为对照组和萝卜硫素(20μmol/L)组,CCK-8法检测细胞增殖;Transwell测定细胞迁移与侵袭.设置对照组、miR-208a-3p模拟物(miR-208a-3p mimic)组及其阴性对照(mimic NC)组、miR-208a-3p 抑制物(miR-208a-3p in
【机 构】
：
郑州大学附属南阳市中心医院普外科,河南南阳 473000;郑州大学第一附属医院小儿外科,河南郑州 450000;南阳市宛城区第一人民医院普外科,河南南阳 473000
论文部分内容阅读
目的 探讨萝卜硫素对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法 用10、20、40μmol/L萝卜硫素处理人正常肝细胞L02、肝癌HepG2细胞48h,通过CCK-8法筛选合适的萝卜硫素浓度用于后续实验;将HepG2细胞分为对照组和萝卜硫素(20μmol/L)组,CCK-8法检测细胞增殖;Transwell测定细胞迁移与侵袭.设置对照组、miR-208a-3p模拟物(miR-208a-3p mimic)组及其阴性对照(mimic NC)组、miR-208a-3p 抑制物(miR-208a-3p inhibitor)组及其阴性对照(inhibitor NC)组、真核翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E,EIF4E3)过表达物(pcDNA-EIF4E3)组及其阴性对照(pcDNA)组、EIF4E3小干扰 RNA(si-EIF4E3)组及其阴性对照(si-NC)组、pcDNA-EIF4E3+mimic NC 组和 pcDNA-EIF4E3+miR-208a-3p mimic 组,利用 LipofectamineTM 2000转染试剂盒对 HepG2细胞进行转染,转染48 h 后,各组分别加入20 μmol/L萝卜硫素处理24 h,qRT-PCR检测HepG2细胞中miR-208a-3p表达;CCK-8法检测细胞增殖;Transwell测定细胞迁移与侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-208a-3p与EIF4E3靶向关系;Western blotting检测细胞中EIF4E3蛋白表达.结果 与对照组比较,萝卜硫素组HepG2细胞在24、48 h的A450值、侵袭及迁移细胞数目显著降低(P＜0.05);HepG2细胞中miR-208a-3p呈高表达,EIF4E3蛋白呈低表达;miR-208a-3p靶向负调控EIF4E3的表达;下调miR-208a-3p或过表达EIF4E3可增强萝卜硫素对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的抑制作用,而过表达miR-208a-3p或沉默EIF4E3则呈相反趋势;同时过表达miR-208a-3p和EIF4E3不会影响萝卜硫素对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的抑制作用.结论 萝卜硫素可能通过下调miR-208a-3p进而上调EIF4E3的表达来抑制HepG2细胞增殖、侵袭及迁移.
其他文献
目的 建立青风藤的液相色谱指纹图谱与含量测定方法,更全面、合理地控制青风藤药材的质量.方法 建立青风藤药材的液相色谱指纹图谱方法,对74批青风藤药材进行分析,使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》对74批青风藤药材进行相似度评价,确定共有峰,使用SIMCA-P(V 14.1)软件对74批青风藤药材的指纹图谱数据进行正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA),从活性物质中选择对青风藤产地
目的 基于Heracles NEO超快速气相色谱电子鼻对温郁金醋制前后气味差异标志物进行快速识别研究,拟建立一种基于气味的有效快速识别方法.方法 通过建立生、醋温郁金的Heracles NEO检测方法,结合Arochembase数据库,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)、判别因子分析(discriminant factor analysis,DFA)和变量投影重要性指标(variable importance in projection,VIP)方法,对其色
目的 研究分心木Diaphragma Juglandis Fructus的化学成分.方法 采用正相硅胶、反相ODS、中压制备液相色谱和制备型高效液相色谱等多种色谱技术和手段进行分离和纯化,通过1D和2D-NMR、HR-ESI-MS等谱学数据分析鉴定化合物结构.结果 从分心木中共分离得到5个脂肪酸类成分,分别鉴定为胡桃酸酯A(1)、胡桃酸酯B(2)、pinellic acid(3)、(Z)-11R,12S,13S-trihydroxy-9-octadecenoate(4)和9S,12S,13S-三羟基十八烷
目的 探究不同热解温度山茱萸Cornus officinalis果核木醋液化学成分及其抑菌活性,筛选出最优热解温度,为山茱萸果核资源的开发与利用提供理论依据.方法 采用干馏法(306～600℃)制取山茱萸果核木醋液,温度每升高50℃收集1次;采用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)技术对其进行定性定量分析;通过滤纸片法测定不同热解温度山茱萸果核木醋液对大肠杆菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果,采用微量肉汤稀释法对抑菌活性最优热解温度
目的 研究银花青蒿栀子方(Yinhua Qinghao Zhizi Description,YQZ)抗A6型柯萨奇病毒(Coxsavirus A6,CV-A6)的活性成分.方法 对YQZ进行提取、分离和结构鉴定,以病毒抑制率为指标追踪其抗CV-A6活性成分,利用Discovery Studio2017软件将其与受体蛋白进行分子对接.结果 YQZ醇提物的石油醚部位分离得到的青蒿酸和青蒿素、正丁醇部位分离得到的栀子苷、绿原酸和木犀草苷对CV-A6的抑制率显著高于阳性对照利巴韦林(P＜0.05、0.01),上述
目的 基于斑马鱼模型和分子对接技术研究心可舒片的促血管生成活性成分.方法 以人脐静脉内皮细胞HUVECs为模型,采用CCK-8与EdU-488细胞增殖检测试剂盒检测细胞活性与增殖能力,采用划痕实验与Transwell实验评价细胞迁移能力,采用成管实验检测各组细胞成管腔能力,评价心可舒片对HUVECs的促血管生成活性.以斑马鱼为模型,采用血管内皮细胞生长因子受体抑制剂PTK787建立斑马鱼节间血管损伤模型,根据各组节间血管长度,评价心可舒片对斑马鱼的促血管生成活性.心可舒片29个成分与表皮生长因子受体(ep
目的 研究巴山花椒Zanthoxylum pashanense根的醋酸乙酯部位的化学成分及其抗炎活性.方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、MCI以及半制备高效液相色谱等多种分离手段进行分离纯化,并结合化合物的理化性质、质谱以及核磁数据进行结构鉴定.采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7炎症反应模型评价其抗炎活性.结果 从巴山花椒根的醋酸乙酯部位中分离出7个生物碱化合物,分别鉴定为15-羟基-柄果花椒酰胺(1)、柄果花椒酰胺(2)、
目的 分析干旱及盐胁迫对黄芩Scutellaria baicalensis中黄酮类成分的影响.方法 运用超高液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱(UHPLC-QTOF-MS)技术对不同干旱及盐胁迫处理组黄芩根部位的化学成分进行分析,运用主成分分析(principal components analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA)和单变量分析(univariate a
目的 整理分析含有石膏的古方,挖掘石膏在治疗热证时的配伍用药规律,并结合“有机小分子活性成分与无机金属离子”间的配位化学探究其解热的物质基础.方法 收集《中医方剂大辞典》中含有石膏且具有解热作用的方剂,构建方药数据库,利用Microsoft Excel 2019统计各中药出现频次,通过SPSS Modeler 18.0对方剂中的药物进行关联规则分析,得到核心药物组合.运用网络药理学分析核心药物组合,得到核心靶点,并进行蛋白互作分析以及基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(
目的 基于蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)/mTOR信号通路探究活心丸对心肌肥大大鼠自噬的影响.方法 SD大鼠ip盐酸异丙肾上腺素诱导心肌肥大,分别给予活心丸和盐酸普萘洛尔进行干预,检测大鼠超声心动图,采用ELISA法检测大鼠血清中心肌肥大指标心房钠尿肽(atrial natriu