正交设计优化半夏相关序列扩增多态性-聚合酶链式反应体系

• 作 者: 杨旻 陈科力
• 机 构: 湖北中医药大学省部共建中药资源和中药复方教育部重点实验室
• 出 处: 湖北中医药大学学报
• 发表日期: 2011年6期
• 关键词: 半夏 正交设计 综合评分法 相关序列扩增多态性-聚合酶链式反应(SRAP—PCB) SRAP Pinellia ternata Orthogonal desig

目的采用正交设计优化半夏SRAP-PCR的反应体系。方法以半夏基因组DNA为模板，应用L16（4^5）正交表，研究了Taq酶、Mg^2＋、随机引物、dNTPs和模板DNA5种SRAP反应组分浓度变化对扩增结果的影响。结果优化反应体系为：25uL反应体系中含有buffer2．5uL、Taq酶1．0U、Mg^2＋ 2．5mmol／L、引物0．8umol／L、dNTPs0．1mmol／L、模板DNA50ng。结论正交设计能客观高效的优化半夏SRAP反应体系。