论文部分内容阅读
【关键词】能力认证；微生物；盲样；沙门氏菌
【中图分类号】R19 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）11-0519-01
能力验证是通过实验室间的比对来确定实验室能力的活动，它可用于确定某个实验室进行某些特定检测或测量的能力，以及监控实验室的持续能力。在评价和保障实验室能力的各种措施中，能力验证活动已经成为我国实验室认可机构广泛采用的重要技术手段。实验室通过参加有效的能力验证活动，并获得满意结果，能够增加客户以及相关方对实验室的信任。我实验室连续多年参加省级和铁道部能力认证，并取得优异成绩。本文总结了2012年中国铁道科学研究院节能环保劳卫研究所针对铁路疾控系统开展的细菌盲样检验活动。现将本次肠炎沙门氏菌能力认证结果分析如下：
1 制定检验方案
对盲样检验预先制定检验方案 包括直接涂片镜检：根据染色性质、菌体形态、排列等特性及所考核的细菌种类范围，推断可能细菌；分离培养：根据推断可能的徐俊选择有关培养基和培养环境。实验试剂准备：所有试剂均使用正规厂商产品，新购置的培养基在投入使用前要进行质量验收工作；实验仪器准备：每天观察记录恒温培养箱，确保培养箱温度的恒定。定期对高压灭菌器进行灭菌效果监测；人员组织：由工作责任心强、有经验的技术人员来完成本次检验任务，需要互相协商、合理分工、落实任务，做好见眼前的各项准备工作。
2 材料与方法
2.1 待测样品 有中国铁道研究院节能环保劳卫研究所提供的玻璃真空瓶冻干样品，每个样品约为25mg，乳白色固体。样品代码为“冻干菌株06组119号”。
2.2 试剂 营养肉汤、ss培养基、EMB、TCBS、麦康凯琼脂、营养琼脂、，庆大霉素、李斯特菌显色培养基、沙门氏菌显色培养基、血平板、CIN-1琼脂、改良Y琼脂等培养基购自杭州微生物试剂有限公司。革兰氏染液和ATB细菌鉴定仪缩影生化系列由梅里埃公司提供。沙门氏菌属诊断血清购自成都生物制品研究所。
2.3检测依据
《食品微生物检验标准》GB 4789-2010、《全国临床检验操作规程（第三版）及其他微生物检验规程》。
2.4 检测方法
2.4.1增菌及分离 在无菌环境下打开冻干菌株管，加入0.2ml营养肉汤，充分混匀。用白金耳取菌液，分别接种在SS、EMB、TCBS、麦康凯琼脂、营养琼脂、庆大霉素琼脂、李斯特菌显色培养基、沙门氏菌显色培养基，血平板上，36℃培养24h。同时，接种CIN-1琼脂平板和改良Y琼脂平板上，26℃培养48h。
2.4.2革兰氏染色镜检
2.4.3氧化酶试验
2.4.4生化试验 取典型菌落接种三糖铁琼脂、赖氨酸脱羧酶试验培养基、半固体培养基；同时接种PH7.2尿素、KCN、蛋白胨水（靛基质试验）生化系列管置36℃培养24h。
2.4.5分群生化试验 接种卫矛醇、山梨醇、水杨苷、ONPG、丙二酸盐生化系列管置36℃培养24h。
2.4.6血清学鉴定 从营养琼脂平板上挑取典型菌落做玻片凝集试验。
3 实验结果及判断
3.1观察菌落形态
3.7结果判定
根据生化试验和血清学诊断的结果，判定冻干菌株119号为：肠杆菌科沙门氏均属D群、肠炎沙门氏菌O9.12：Hg.m：-
4 讨论
通過实验室能力认证使上级机构了解某微生物实验室的检验技术整体水平，同时也使实验室工作从能力认证过程中发现存在的问题，制定相应的措施，改善实验室质量管理，不断提高检验技术水平。通过本次盲样检验，使我实验室技术人员对疑难问题的分析能力、综合分析能力有了较大提高。具体有一下几方面的体会：
4.1 提高室内质量控制要求
为开展好日常的检验工作，必须保证实验室检验水平的稳定并不断提高检验能力。进行实验室内部质量控制，对仪器设备、培养基、试剂等，用标准菌株进行质量监测，并在有效期内使用，确保试验结果的可靠。
4.2 做好盲样检验的预方案
应尽可能的分析存在细菌的种类，确定选用的各种培养基及培养环境。做好仪器的准备工作和人员的准备工作。
4.3 检验人员的技术知识需要与时俱进
通过参加上级机构组织的各种专业学习班，参加有关学术会议，订阅国内外的专业书刊，及时的了解微生物检验方法的动态。在微生物检验技术的不断更新和多样化的情况下必须不断进行知识更新才能更好的完成检验工作。
参考文献：
[1] 全国临床检验操作规程（第三版）及其他微生物检验规程.2005
[2] 何晓清.卫生防疫细菌检验.南昌：新华出版社，1989.6.
[3] 陈昕，黄振华，朱莹.微生物实验室间比对的结果分析[J].中国卫生检验杂志，2008，18（3）：554-555.
[4] 洪丽君.室间质控细菌盲样检验方法分析探讨[J]. 中国卫生检验杂志，2010，20（12）：3529-3531
【中图分类号】R19 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）11-0519-01
能力验证是通过实验室间的比对来确定实验室能力的活动，它可用于确定某个实验室进行某些特定检测或测量的能力，以及监控实验室的持续能力。在评价和保障实验室能力的各种措施中，能力验证活动已经成为我国实验室认可机构广泛采用的重要技术手段。实验室通过参加有效的能力验证活动，并获得满意结果，能够增加客户以及相关方对实验室的信任。我实验室连续多年参加省级和铁道部能力认证，并取得优异成绩。本文总结了2012年中国铁道科学研究院节能环保劳卫研究所针对铁路疾控系统开展的细菌盲样检验活动。现将本次肠炎沙门氏菌能力认证结果分析如下：
1 制定检验方案
对盲样检验预先制定检验方案 包括直接涂片镜检：根据染色性质、菌体形态、排列等特性及所考核的细菌种类范围，推断可能细菌；分离培养：根据推断可能的徐俊选择有关培养基和培养环境。实验试剂准备：所有试剂均使用正规厂商产品，新购置的培养基在投入使用前要进行质量验收工作；实验仪器准备：每天观察记录恒温培养箱，确保培养箱温度的恒定。定期对高压灭菌器进行灭菌效果监测；人员组织：由工作责任心强、有经验的技术人员来完成本次检验任务，需要互相协商、合理分工、落实任务，做好见眼前的各项准备工作。
2 材料与方法
2.1 待测样品 有中国铁道研究院节能环保劳卫研究所提供的玻璃真空瓶冻干样品，每个样品约为25mg，乳白色固体。样品代码为“冻干菌株06组119号”。
2.2 试剂 营养肉汤、ss培养基、EMB、TCBS、麦康凯琼脂、营养琼脂、，庆大霉素、李斯特菌显色培养基、沙门氏菌显色培养基、血平板、CIN-1琼脂、改良Y琼脂等培养基购自杭州微生物试剂有限公司。革兰氏染液和ATB细菌鉴定仪缩影生化系列由梅里埃公司提供。沙门氏菌属诊断血清购自成都生物制品研究所。
2.3检测依据
《食品微生物检验标准》GB 4789-2010、《全国临床检验操作规程（第三版）及其他微生物检验规程》。
2.4 检测方法
2.4.1增菌及分离 在无菌环境下打开冻干菌株管，加入0.2ml营养肉汤，充分混匀。用白金耳取菌液，分别接种在SS、EMB、TCBS、麦康凯琼脂、营养琼脂、庆大霉素琼脂、李斯特菌显色培养基、沙门氏菌显色培养基，血平板上，36℃培养24h。同时，接种CIN-1琼脂平板和改良Y琼脂平板上，26℃培养48h。
2.4.2革兰氏染色镜检
2.4.3氧化酶试验
2.4.4生化试验 取典型菌落接种三糖铁琼脂、赖氨酸脱羧酶试验培养基、半固体培养基；同时接种PH7.2尿素、KCN、蛋白胨水（靛基质试验）生化系列管置36℃培养24h。
2.4.5分群生化试验 接种卫矛醇、山梨醇、水杨苷、ONPG、丙二酸盐生化系列管置36℃培养24h。
2.4.6血清学鉴定 从营养琼脂平板上挑取典型菌落做玻片凝集试验。
3 实验结果及判断
3.1观察菌落形态
3.7结果判定
根据生化试验和血清学诊断的结果，判定冻干菌株119号为：肠杆菌科沙门氏均属D群、肠炎沙门氏菌O9.12：Hg.m：-
4 讨论
通過实验室能力认证使上级机构了解某微生物实验室的检验技术整体水平，同时也使实验室工作从能力认证过程中发现存在的问题，制定相应的措施，改善实验室质量管理，不断提高检验技术水平。通过本次盲样检验，使我实验室技术人员对疑难问题的分析能力、综合分析能力有了较大提高。具体有一下几方面的体会：
4.1 提高室内质量控制要求
为开展好日常的检验工作，必须保证实验室检验水平的稳定并不断提高检验能力。进行实验室内部质量控制，对仪器设备、培养基、试剂等，用标准菌株进行质量监测，并在有效期内使用，确保试验结果的可靠。
4.2 做好盲样检验的预方案
应尽可能的分析存在细菌的种类，确定选用的各种培养基及培养环境。做好仪器的准备工作和人员的准备工作。
4.3 检验人员的技术知识需要与时俱进
通过参加上级机构组织的各种专业学习班，参加有关学术会议，订阅国内外的专业书刊，及时的了解微生物检验方法的动态。在微生物检验技术的不断更新和多样化的情况下必须不断进行知识更新才能更好的完成检验工作。
参考文献：
[1] 全国临床检验操作规程（第三版）及其他微生物检验规程.2005
[2] 何晓清.卫生防疫细菌检验.南昌：新华出版社，1989.6.
[3] 陈昕，黄振华，朱莹.微生物实验室间比对的结果分析[J].中国卫生检验杂志，2008，18（3）：554-555.
[4] 洪丽君.室间质控细菌盲样检验方法分析探讨[J]. 中国卫生检验杂志，2010，20（12）：3529-3531